Human IL-23 Valukine ELISA Kit

Human IL-23 Valukine ELISA Kit

人 IL-23 ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL116
适用于定量检测天然和重组人白介素 23（IL-23）的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

背景
白细胞介素 23 (IL-23)是一种由 IL-23 特有的 p19 亚基和与 IL-12 共享的 p40 亚基组成的
二硫键连接的细胞因子(1-4)。它是由活化的巨噬细胞、小胶质细胞和单核细胞来源的树
突状细胞产生，以应对包括某些细菌和病毒和/或其组分等病原体的攻击(1)。功能性 IL-23
受体复合物包含两个受体亚基，IL-12 受体β1 亚基 (IL-12Rβ1) 和 IL-23 特异性的受体亚
基 (IL-23 R) (4)。该受体复合物表达在小鼠 Th1、Th2 细胞，骨髓树突状细胞，活化的巨
噬细胞和 CD4+ CD45Rb (low) 记忆 T 细胞。IL-23 免疫途径诱导中性粒细胞最早募集到
感染灶(2)。IL-23 亦加强了 Th17 细胞的发育和维持(1,2,5)。它促进了 Th17 介导的自身
免疫(3,5-7)和肿瘤进展(8)。在人类，IL-23 在包括牛皮癣、克罗恩病和多发性硬化在内的
几种免疫功能失调疾病中表达上调(9-11)。

概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心 ELISA 法。抗人 IL-23 捕获抗体包被于微孔板上，经过孵育，
样品和标准品中的人 IL-23 会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入生
物素化的抗人 IL-23 检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉亲和素标记
的辣根过氧化物酶(Streptavidin-HRP)孵育。洗涤去除未结合的试剂后，加入 TMB 底物溶
液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本。
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检
测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、
洗板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。

优势
A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的三个样本，在同一板内分别检测 20 次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板中分别检测 20 次，以确定板间精确度。
板内精确度 板间精确度
样本 1 2 3 1 2 3
平均值（pg/mL） 346.3 1710 8656.1 351.8 1692.3 8365.3
标准差 15.1 30.9 298.7 20.8 98.7 406.1
CV% 4.4 1.8 3.5 5.9 5.8 4.9
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人 IL-23，测定其回收率。回收率范围在
93.9-103.2%，平均回收率在 99.8%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人 IL-23，测定其回收率。回收率范围在
91.7-99.1%，平均回收率在 96.2%。
C. 灵敏度
人 IL-23 的最低可测剂量（MDD）一般小于 20.5 pg/mL。
MDD 是根据 20 个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。

D. 校正
此 ELISA 试剂盒经由 R&D Systems®生产的 Sf 21 表达的高纯度重组人 IL-23 蛋白所校正。
E. 线性
不同的样本中掺入高浓度的人 IL-23，然后用标准品稀释液（1×）将样本稀释到检测范围
内，测定其线性。

F. 样本值
人血清- 使用本试剂盒检测了 40 份来自健康志愿者的样本中人 IL-23 的水平。这些样本
捐献者没有病史。所有样本均低于人 IL-23 最低标准品，187.5 pg/mL。
G. 特异性
此 ELISA 法可检测天然及重组人 IL-23 蛋白。对制备的 50 ng/mL 的下列因素进行了测定，
无交叉反应或干扰。
Recombinant Human： Recombinant Mouse：
IL-6 IL-23
IL-11 IL-23 p19
IL-12 Other recombinants
IL-12/IL-23 p40 Rat IL-23
IL-12 Rβ2/Fc Chimera Canine IL-23 p19
IL-23 p19 Feline IL-23 p19
重组人 IL-12 Rβ1/Fc Chimera 及重组人 IL-23 R/Fc Chimera 没有交叉作用，但当浓度>
3125 pg / mL 时有干扰。