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- AAT Bioquest
- 美国
- 12535
- 2026年01月06日
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在零下15度以下保存, 避免光照
- 保质期：
2年
- 英文名：
Amplite® Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit *Bright Glow*
- 库存：
1
- 供应商：
AAT Bioquest
Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒
| 货号 | 12535 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 1 plate | 价格 | 2544 |
| Ex (nm) | 429 | Em (nm) | 466 |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于荧光素酶报告基因的试剂盒，β-半乳糖苷酶，β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶是常见的报告基因，而这其中，萤火虫荧光素酶是功能最多的报告基因。最近，其它荧光素酶的使用在逐渐稳固的上升，例如海肾荧光素酶。由于海肾荧光素酶受体分子非常小，因此不需要ATP的辅助。Amplite 海肾荧光素酶报告基团检测试剂盒提供了一个快速灵敏的检测海肾荧光素酶活性的方案。该方案使用了独特的冷光基质形成以实现基于细胞的胞内海肾荧光素酶活性检测。独特的冷光基质与海肾荧光素酶反应时，发射强烈的冷光。本试剂盒提供所有必需组分，并且适用于HTS（高通量筛选）研究。本试剂盒灵敏度高，可以便捷地用于96或384微孔板分析。本检测法适合标准的细胞生长培养基，也可用于原始或合成的hRluc基因表达检测。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备细胞板
2.根据需要处理细胞
3.从细胞板中去除培养基
4.加入海藻荧光素酶工作溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）
5.在室温下孵育5-10分钟
6.监控发光强度
溶液制备
1.工作溶液
将一体积的100X荧光素酶底物（组分A）添加到100体积的测定缓冲液（组分B）中，制成海肾荧光素酶工作溶液。 注意：重组的海肾荧光素酶工作溶液对光非常敏感，应避免光照。 另外，它不稳定，应准备新鲜，放在冰上并在2小时内使用。
样品操作及分析
1.通过在所需化合物缓冲液中加入10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）来用测试化合物处理细胞（或样品）。
2.将细胞板在5％CO2培养箱中于37°C孵育所需的时间，通常为4小时至过夜。
完全取出介质。
3.每孔海藻荧光素酶工作溶液中加入100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）。
4.在室温下将平板孵育5-10分钟。 避光。
5.用发光计监控发光强度。
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- 内容
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文献和实验Reassembly of a bioluminescent protein Renilla luciferase directed through DNA hybridization
Authors: Cissell KA, Rahimi Y, Shrestha S, Deo SK.
Journal: Bioconjug Chem (2009): 15
RNA detection using peptide-inserted Renilla luciferase
Authors: Andou T, Endoh T, Mie M, Kobatake E.
Journal: Anal Bioanal Chem (2009): 661
The cAMP-dependent protein kinase inhibitor H-89 attenuates the bioluminescence signal produced by Renilla Luciferase
Authors: Herbst KJ, Allen MD, Zhang J.
Journal: PLoS One (2009): e5642
Bioluminescent indicators for Ca2+ based on split Renilla luciferase complementation in living cells
Authors: Kaihara A, Umezawa Y, Furukawa T.
Journal: Anal Sci (2008): 1405
Coelenterazine-binding protein of Renilla muelleri: cDNA cloning, overexpression, and characterization as a substrate of luciferase
Authors: Titushin MS, Markova SV, Frank LA, Malikova NP, Stepanyuk GA, Lee J, Vysotski ES.
Journal: Photochem Photobiol Sci (2008): 189
Mutational optimization of the coelenterazine-dependent luciferase from Renilla
Authors: Woo J, von Arnim AG.
Journal: Plant Methods (2008): 23
Structure-function studies on the active site of the coelenterazine-dependent luciferase from Renilla
Authors: Woo J, Howell MH, von Arnim AG.
Journal: Protein Sci (2008): 725
Crystal structures of the luciferase and green fluorescent protein from Renilla reniformis
Authors: Loening AM, Fenn TD, Gambhir SS.
Journal: J Mol Biol (2007): 1017
Hormone treatment enhances WT1 activation of Renilla luciferase constructs in LNCaP cells
Authors: Hanson J, Reese J, Gorman J, Cash J, Fraizer G.
Journal: Front Biosci (2007): 1387
Quantification of dynamic protein complexes using Renilla luciferase fragment complementation applied to protein kinase A activities in vivo
Authors: Stefan E, Aquin S, Berger N, Landry CR, Nyfeler B, Bouvier M, Michnick SW.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2007): 16916
在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ，通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因（比如CAT，β-Gal，GUS）不够便利。因为各自的测试化学，处理要求，检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术，结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统，结合pRL载体系统，表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶，在单管中进行双荧光素酶报告基因测试，快速，灵敏，简便。系统还提供PLB裂解液，用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞，不需操作单个样品
zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题，未得其解，恳请帮助。 做荧光素酶报告基因的时候，检测的是细胞因子的启动子。换句话说，是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内，通过刺进因素作用后，检测启动子的表达情况。这个是背景。 问题是，怎么通过使用内参的方法，去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。 因为，个人认为，细胞数对报告基因的表达量影响比较大。 谢谢。 daidaiyidaidai
【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因？谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题，两者的区别我基本清楚了，只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒（分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因）呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因？还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话，是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因，还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件？谢谢 msniu
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