
蛋白质质谱鉴定-混合样品/单一样品鉴定
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- 辉骏生物蛋白质被酶切消化成肽段混合物,肽段在质谱仪中被电离形成带电离子。质谱分析器的电场、磁场将具有特定质荷比(M/Z)的肽段离子分离开来,检测器收集带电离子,质量分析器可分析出每个肽段的M/Z,即蛋白质的一级质谱峰图。离子选择装置自动选取强度较大的肽段离子进行二级质谱分析,输出选取肽段的二级质谱峰图。最后将实验所得的质量数与数据库中蛋白质经过理论酶切消化后产生的一级和二级质谱峰图进行比对,检索出相应蛋白质。 辉骏生物采用Ultraflex III TOF/TOF)进行单一蛋白的质谱鉴定,已成功完成了五万多个蛋白质的鉴定,并可进行后续蛋白功能研究等一整套技术服务。 辉骏生物技术应用
- 广州
- 2026年01月06日
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蛋白质质谱鉴定
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辉骏生物
蛋白质被酶切消化成肽段混合物,肽段在质谱仪中被电离形成带电离子。质谱分析器的电场、磁场将具有特定质荷比(M/Z)的肽段离子分离开来,检测器收集带电离子,质量分析器可分析出每个肽段的M/Z,即蛋白质的一级质谱峰图。离子选择装置自动选取强度较大的肽段离子进行二级质谱分析,输出选取肽段的二级质谱峰图。最后将实验所得的质量数与数据库中蛋白质经过理论酶切消化后产生的一级和二级质谱峰图进行比对,检索出相应蛋白质。
辉骏生物采用Ultraflex III TOF/TOF)进行单一蛋白的质谱鉴定,已成功完成了五万多个蛋白质的鉴定,并可进行后续蛋白功能研究等一整套技术服务。
LC-MS/MS质谱鉴定技术应用—辉骏生物
1、纯化的蛋白质溶液、条带或干粉;
2、2D电泳的蛋白质斑点。
蛋白质谱鉴定服务内容—辉骏生物
1、蛋白质样品制备,包括蛋白质的分离、纯化、酶切
2、质谱鉴定和数据库检索
混合蛋白的质谱鉴定—辉骏生物
针对混合蛋白样品的质谱鉴定方法被称为“鸟枪法”或者多维蛋白质鉴定技术(Mud PIT)。先将蛋白溶液或SDS-PAGE条带酶切成肽段混合物,再用高效液相色谱将其分离成简单组分,最后依次导入高分辨率质谱仪中进行质量分析。
技术应用
混合蛋白样品,如:IP、Co-IP、pull down等实验的洗脱蛋白,细胞裂解液,体液,组织提取液,分泌蛋白等。
辉骏生物技术优势
1、高通量,分离能力强,一次可鉴定数十种蛋白质,是高效的蛋白质组学研究手段。
2、兼容性强,可分析多种形式的蛋白质,如蛋白质条带、组织提取液、全细胞裂解液、亚细胞分离组分等。
3、自动化程度高,液相与质谱连用,自动化操作,分析速度快,分离效果好。
辉骏生物服务内容
1、蛋白质样本制备(客户可提供已制备好的样本,如蛋白质溶液或SDS-PAGE条带);
2、蛋白质酶切、液相分离、质谱鉴定和数据库检索。
辉骏生物服务须知
服务周期及实验费用: 拨打我公司全国免费热线电话 400 699 1663
了解更多蛋白质组学服务详情可登陆我司网址www.fitgene.com
更多实验项目请联系我们:
微信:18927549345
电话:400-699-1663
邮箱: service@fitgene.com
蛋白质质谱鉴定官网:www.fitgene.com
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文献和实验基于质谱的蛋白质鉴定,第6节:MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
物干燥,连续洗涤使用预制型的薄层基质。该方法为精确和灵敏的MALDI检测创造了最佳条件。然而,这种样品制备方法制备的样品不能承受激光辐射,会被迅速漂洗。因此,该方法不适用于PSD光谱的蛋白质谱鉴定,因为PSD光谱法通常每个片段质量范围需要多达100甚至以上次数反复的激光辐射。 如果在分析之前,使用小型吸附柱对较大体积的肽混合物进行浓缩,抑或通过向肽混合物中添加少量反相色谱珠的方式进行批量吸附。而进行批量吸附,只需要将磁珠吸附到的肽混合物进行洗涤,即可获得肽混合物,然后转移至上样处并干燥即可。这种
蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)对解析生命活动过程与疾病发生发展过程至关重要。随着时代发展,虽然大规模、高通量的生物学研究手段大大促进了蛋白质相互作用的预测,但这种预测还需要进一步利用体外和体内系统进行验证。分析蛋白质互作的方法多种多样,本篇文章为大家介绍以下几种互作分析技术: 免疫共沉淀 Co-IP 免疫沉淀 (IP)、免疫共沉淀 (Co-IP)和 pull-down 都是常用的从复杂的混合样品中获取目标分子,以进行下一步分析的方法,如检测蛋白质能否相互作用。在此类实验中,被研究的蛋白质称为
或色谱分离,都可以再将肽的混合物提送到一个MS/MS仪器。然后将MS/MS图谱传送到能够读取这些数据的专门工具,如Mascot(Perkins等,1999)、Sequest(Eng,McCormack和Yates,1994)或其他类似的工具。在得不到成功鉴定的情况下,MS/MS数据可以传送至从头测序的工具,这样的目的是不必将实验数据与序列数据库的序列进行比较,而直接从MS/MS图谱中抽取序列的信息。 因为技术本身和样品的复杂性、蛋白质的性质或不同实验室所用的仪器等固有的局限,目前已对
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