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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
2年
- 英文名：
P9细胞
- 库存：
10000
- 供应商：
上海信裕
- 保存条件：
37度
小鼠骨髓基质细胞培养操作步骤：
培养基的配置：基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置：DMSO18ml+胎牛血清2ml。 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套（2.5μl、20μl、200μl、1ml），酒精灯1盏，液器1台，斜架1台，酒精喷壶1个，酒精棉球缸1个，污缸1个， 常规耗材：培养瓶（50㎝2），定量移液管（5ml、10ml），枪头（1ml、200μl、10μl），培养皿，6/24/48/96孔板，医用脱脂棉球，保种管 所需试剂：gibco高糖培养基，胎牛血清，双抗，DMSO，胰酶，苯扎溴氨，75%酒精…… 实验前准备： 所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内，用酒精喷壶喷洒实验台面，并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。 首次传代前细胞的复苏，小鼠骨髓基质细胞首先用一大烧杯盛满37℃的温水放于液氮罐旁边，待细胞株取出后留上端1/3于37℃水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。
细胞培养应注意的问题：
细胞培养过程中，从实验室的设计到实验过程中的操作，都需要严格控制无菌。由于细胞对于生长的条件比较苛刻，所以无论从实验室的设计，还是使用的物品及细胞培养的操作过程，都要注意保持无菌环境。
冷冻保存细胞之方法：
冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C30~60分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。 冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下，再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成小鼠骨髓基质细胞细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度：
冷冻管内细胞数目一般为1x106cells/mlvial，融合瘤细胞则以5x106cells/mlvial为宜。
应如何避免细胞污染：
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。
小鼠骨髓基质细胞公司其它细胞产品展示：615小鼠滑膜肉瘤瘤株 ZM755细胞
615小鼠肺癌瘤株
615小鼠T细胞性白血病瘤株 L7912细胞
5-8转基因鼻咽癌细胞系 F2-2细胞
293T/17人胚肾细胞 293T/17细胞
1肝细胞
129小鼠ES细胞 E14细胞
129小鼠ES细胞 D3细胞
(舌鳞癌细胞 Tca-8113细胞
(卵巢癌细胞 HO-8910细胞
(急性粒细胞白血病细胞) HL-60 细胞
(肝癌细胞 SK-HEP-1细胞
(膀胱鳞癌细胞 SCaBER细胞
( 胚肾细胞 ) AAV-293细胞
转化的非洲绿猴肾细胞 COS-7(SV40细胞
中国仓鼠卵巢细胞 CHO细胞
乳腺管癌 T47-D细胞
人正常皮肤细胞 Hacat细胞
人胃腺癌细胞（低分化） Human BGC-823细胞
人乳腺导管癌细胞 BT474细胞
人前列腺正常细胞 rwpe2细胞
人胚肾细胞 293 [HEK-293] 细胞
人结肠癌细胞 HCT-8细胞
人肝癌细胞 hep 3B细胞
回盲肠腺癌 HCT-8细胞
骨髓瘤细胞株 U266细胞
肝转移癌 HCCLMS细胞
分泌A2抗体B淋巴细胞 BB7.2细胞
低分化胃腺癌 BGC-823细胞
大鼠肾细胞 NRK-52E细胞
培养基的配置：基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置：DMSO18ml+胎牛血清2ml。 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套（2.5μl、20μl、200μl、1ml），酒精灯1盏，液器1台，斜架1台，酒精喷壶1个，酒精棉球缸1个，污缸1个， 常规耗材：培养瓶（50㎝2），定量移液管（5ml、10ml），枪头（1ml、200μl、10μl），培养皿，6/24/48/96孔板，医用脱脂棉球，保种管 所需试剂：gibco高糖培养基，胎牛血清，双抗，DMSO，胰酶，苯扎溴氨，75%酒精…… 实验前准备： 所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内，用酒精喷壶喷洒实验台面，并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。 首次传代前细胞的复苏，小鼠骨髓基质细胞首先用一大烧杯盛满37℃的温水放于液氮罐旁边，待细胞株取出后留上端1/3于37℃水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。
细胞培养应注意的问题：
细胞培养过程中，从实验室的设计到实验过程中的操作，都需要严格控制无菌。由于细胞对于生长的条件比较苛刻，所以无论从实验室的设计，还是使用的物品及细胞培养的操作过程，都要注意保持无菌环境。
冷冻保存细胞之方法：
冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C30~60分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。 冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下，再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成小鼠骨髓基质细胞细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度：
冷冻管内细胞数目一般为1x106cells/mlvial，融合瘤细胞则以5x106cells/mlvial为宜。
应如何避免细胞污染：
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。
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615小鼠肺癌瘤株
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293T/17人胚肾细胞 293T/17细胞
1肝细胞
129小鼠ES细胞 E14细胞
129小鼠ES细胞 D3细胞
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(急性粒细胞白血病细胞) HL-60 细胞
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低分化胃腺癌 BGC-823细胞
大鼠肾细胞 NRK-52E细胞
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文献和实验相关实验
小鼠骨髓单细胞悬液制备流程 颈椎脱臼法处死小鼠，放在75%酒精中浸泡5 min。提前于超净台上准备一个消毒托盘（可用无菌口罩或者用浸满酒精的纱布代替），取出小鼠并铺于消毒托盘上。 在无菌环境下取小鼠的后肢骨。用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开，并分离两下肢的皮肤。将皮肤往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，游离出小鼠的两条后肢。 小心剥离肌肉（肌肉两端的白色坚韧组织为肌腱，可以顺着肌腱分离，肌肉主要靠肌腱与关节相连），分别剪下Femurs（股骨）和Tibias（胫骨
大鼠骨髓基质细胞的体外培养 大鼠骨髓基质细胞的体外培养.pdf
1. 实验原理 小鼠骨髓细胞有高度的分裂活性，并且数量非常多，因此不必进行体外培养，可直接观察到分裂期细胞。处于分裂期的细胞经秋水仙素处理，阻断纺锤丝的形成，使细胞分裂停止于中期，此时染色体达到最大收缩，具有典型的形态。低渗处理使细胞破裂，便于染色体分散。该方法在临床上多用于白血病的研究，也可用于观察毒性物质对机体遗传物质——染色体损伤的状况。 小鼠染色体2n=40,均为端着丝粒染色体, 雄性为40，XY，雌性为40，XX。 2. 实验试剂与器材 显微镜、恒温
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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