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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
2年
- 英文名：
BHK-21细胞
- 供应商：
上海信裕
- 保存条件：
37度
培养基的配置：基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置：DMSO18ml+胎牛血清2ml。 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套（2.5μl、20μl、200μl、1ml），酒精灯1盏，液器1台，斜架1台，酒精喷壶1个，酒精棉球缸1个，污缸1个， 常规耗材：培养瓶（50㎝2），定量移液管（5ml、10ml），枪头（1ml、200μl、10μl），培养皿，6/24/48/96孔板，医用脱脂棉球，保种管 所需试剂：gibco高糖培养基，胎牛血清，双抗，DMSO，胰酶，苯扎溴氨，75%酒精…… 实验前准备： 所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内，用酒精喷壶喷洒实验台面，并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。叙利亚仓鼠肾细胞 首次传代前细胞的复苏，首先用一大烧杯盛满37℃的温水放于液氮罐旁边，待细胞株取出后留上端1/3于37℃水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。
细胞培养应注意的问题： 叙利亚仓鼠肾细胞
细胞培养过程中，从实验室的设计到实验过程中的操作，都需要严格控制无菌。由于细胞对于生长的条件比较苛刻，所以无论从实验室的设计，还是使用的物品及细胞培养的操作过程，都要注意保持无菌环境。
冷冻保存细胞之方法：
冷冻保存方法一:叙利亚仓鼠肾细胞冷冻管置于4°C30~60分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。 冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下，再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度：
冷冻管内细胞数目一般为1x106cells/mlvial，融合瘤细胞则以5x106cells/mlvial为宜。
应如何避免细胞污染：
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。
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文献和实验。（以 1：2 到 1：6 为宜，每周传代 2 - 3 次）冻存：95% 培养液 + 5% DMSO 冻存于液氮。7. Sf9 细胞Sf9 细胞常在 Baculovirus（杆状病毒）表达系统中用作宿主细胞，来表达外源蛋白。来源：叙利亚仓鼠肾细胞形态：纤维原细胞生长特性：贴壁注释：这个细胞来自于一只出生一天的新生仓鼠，随后被改造成一个易于作表达的宿主细胞株。培养液：MEM（含 2 mM L - 谷氨酰胺和 Earle's BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠）+ 10
叙利亚地鼠，金黄色，体重150克，染色体22对，1930年自中东叙利亚引起，各实验室饲养有所不同，但遗传上比较一致，无大变异。应用最多，主要分布在东欧、南欧和亚洲的少数地区。 2．中国地鼠（Chinese hamster,Cricetulus gviseus）或称条背地鼠和黑线仓鼠，灰色、体形小，染色体22对，体重约40克。栖住于中国的东海岸至里海的东海岸这一地区。 3．欧洲黑腹地鼠（European hamster；Cricetus Cricetus）：体形大，性凶猛，体重约200克，染色
一抗的物种来源。 抗体是根据一抗的物种来源的字母表顺序排列。比如，如果一抗是小鼠来源的，就找“ anti-mouse ”。 说明：目录中提供了抗叙利亚仓鼠和抗亚美尼亚仓鼠的抗体。为了正确的选择二抗，必须知道一抗是在哪种仓鼠中制备的。 第三步： 在标有“ Host ”这一栏中选择二抗的物种来源。 二抗的物种来源在抗体描述的开始部分，选择二抗的物种来源应考虑几点: 1) 个人的取向或经验。 二抗的质量问题与物种特异性没有关系。2 ）与蛋白A 和蛋白G 结合。兔抗体能很好地与蛋白
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