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北京盛科博源生物科技有限公司
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文献和实验Chemicon公司的CpGenome DNA Modification Kit 的protocol修正
结果中M,U,W都有产物,则提高些退火温度,因为毕竟这几对引物都只由几次位点甚至只有一个位点的差异,故非特异结合的可能性很大。 另外,每次PCR前一定把处理的DNA离心一下,因为会有残留的小珠,即Reagent III,它会影响PCR的结果。 还有问题,欢迎发帖一起讨论:)
Insert Control ligation mix 4.0 ml 4.0 ml insert 1.0 ml --- ml T4 DNA ligase (400 u/ml)
Recommended Reagent Concentrations: Primers: 0.2 - 1.0 uM Nucleotides: 50 - 200 uM EACH dNTP Dimethyl sulphoxide (DMSO): 0 - 10% (v/v) Taq polymerase: 0.5 - 1.0 Units/50ul rxn Target DNA: 1 ng - 1 ug (NB: higher concn for total genomic DNA
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