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- 江苏无锡
- 2025年12月30日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
基因组DNA提取服务
- 提供商：
无锡菩禾生物医药技术有限公司
- 规格：
/样
从新鲜组织、血液、细胞、细菌等多种材料中提取基因组DNA，不同种类的材料中提取的基因组DNA量不同，而且差异也比较大，一般材料的基因组DNA提取情况如下：
| 材料种类 | 样品要求 | 起始量 | 收量 |
| 血液 | 新鲜血液及抗凝剂处理的全血 | 100 μl | 1 μg左右 |
| 培养细胞 | 离心收集的细胞 | 1×106 | 10 μg左右 |
| 动物组织 | 一般材料 | 100 mg | 5~10 μg |
| 植物 | 一般材料 | 100 mg | 5~10 μg |
| 细菌 | 菌悬液或离心收集后的菌体 | 1×108 | 1~2 μg |
实验步骤
1、贴壁细胞用胰酶消化，离心收集。
2、细胞重悬于冰冷的PBS漂洗一次，离心收集。
3、重复2。
4、加入5ml DNA提取缓冲液，(10m mol/L Tris-cl，0.1 mol/L EDTA，0.5% SDS)，混匀。
5、加入25ul 蛋白酶K，使终浓度达到100ug/ml，混匀，50℃水浴3h。
6、用等体积的酚抽提一次，2500r/min 离心收集水相。用等体积的（酚，氯仿，*戊醇）混合物抽提一次，2500r/min 离心收集水相。
用等体积的氯仿，*戊*抽提一次。
7、加入等体积的5mol/L 的LiCL，混匀，冰浴，10min。
8、2500r/min，离心10min. 转上清与一离心管中。加入等体积的异丙醇。室温10分钟。
9、2500r/min，离心10min。弃上清。加入0.1倍 体积3mol/L 乙酸钠(PH5.2)与2倍体积-20℃预冷无水乙醇。-20℃ 20分钟。
10、12000r/min, 室温离心5分钟。弃上清。将DNA溶于适量TE中。
结果展示：
实验完成周期及交付标准：
1.实验周期: 1周
2.交付标准：基因组DNA、完整实验报告（电泳照片、OD值测定结果等）
需确认的信息（客户提供）：
1.新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细莹等)
2.4°C保存一周，-20°C保存一个月, -80°C保存一年血液样品 (EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
3.详细的背景资料:来源、特点类型等
报价：
| 细胞平台 | 行为学检测 | 动物模型 |
| 原代细胞制备与培养 | 水迷宫检测 | 慢性胰腺炎模型 |
| 细胞培养、传代 | 十字架 | 肝纤维化模型 |
| 原代细胞传代培养 | 非酒精性脂肪肝 | |
| 细胞系STR鉴定服务 | 动物模型 | 骨质疏松模型 |
| 细胞转染 | 小/大鼠饲养 | 糖尿病模型 |
| MTT细胞增殖、活性、毒性检测 | 小/大鼠灌胃 | 眼外伤模型 |
| CCK8细胞增殖、活性、毒性检测 | 兔子饲养费 | 青光眼模型 |
| 流式细胞凋亡检测 | 大鼠灌胃 | 烧烫伤模型 |
| 流式细胞周期检测 | 小鼠灌胃 | 短肠模型 |
| 血管形成实验（非钙染/钙染） | 兔子灌胃 | 肾衰模型 |
| ROS检测 | 腹腔/肌肉给药（大小鼠） | 肾炎模型 |
| 划痕实验 | 腹腔/肌肉给药（兔子） | 尿路结石 |
| 克隆形成实验 | 尿液/粪便采集 | 高氧/低氧损伤模型 |
| 粘附实验 | 血液采集 | |
| transwell实验（迁移） | TTC染色 | 病理平台 |
| transwell实验（侵袭） | 超声检测 | 组织包埋 |
| 贴壁/悬浮细胞转细胞株构建 | 血常规检测 | 冰冻/石蜡切片 |
| 耐药细胞株筛选构建 | DR检测 | HE染色 |
| 骨组织切片 | 其他特殊染色 | |
| 分子平台 | microCT | 全扫描拍照 |
| 载体构建 | 皮下瘤模型 | 扫描电镜 |
| 细胞/组织/血液RNA提取 | 移植瘤模型 | 透射电镜 |
| mRNA/miRNA等引物设计 | 原位瘤模型 | 共聚焦拍照 |
| RT-qPCR检测 | 心肌缺血再灌注模型 | |
| CHIP检测 | 门静脉高压动物模型 | |
| EMSA检测 | 高血压动物模型 | |
| 双荧光素酶实验 | 心肌梗死动物模型 | |
| 原位杂交 | 动脉粥样硬化动物模型 | |
| 脑缺血再灌注 | ||
| 免疫平台 | 肾性高血压模型 | |
| 蛋白（核/膜/总）提取 | 主动脉弓狭窄模型 | |
| 蛋白含量测定 | 脊髓损伤模型 | |
| Western Blot检测 | 背根神经节损伤模型 | |
| COIP | 脑瘫模型 | |
| 免疫组化/荧光 | 癫痫模型 | |
| 抑郁症模型 | ||
| 行为学检测 | 肾脏缺血再灌注模型 | |
| 水迷宫检测 | 关节炎 | |
| 十字架 | 肺气肿模型 |
六、实验服务流程
无锡菩禾生物是一家专业提供生物医药技术服务和细胞整体解决方案的高科技企业。拥有CMA 质量体系认证的实验室，5大技术平台（细胞平台、分子平台、免疫平台、病理平台、动物平台），以专业、严谨、求真、高效服务理念，为全国科研工作者提供一站式技术检测服务。
公司地址：江苏省江阴市砂山路85号
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文献和实验
/L KAc(4) RNaseA 10mg/ml(5) 异丙醇(6)灭菌ddH2O或TE3. 仪器: 离心机， 恒温水浴, 台式高速离心机，电泳装置二 实验程序1取幼嫩的组织材料1-2g,用蒸馏水冲洗干净，再用灭菌ddH2O冲洗2次，放入经液氮预冷的研钵中，加入液氮研磨至粉末状，用干净的灭菌不锈钢勺转移粉末到加有500μL提取液的离心管中,轻轻混匀。2 向管中加入50μL20%SDS溶液，混匀，不可过于强烈震荡以防基因组DNA断裂 ，65℃保温10min，并不时摇动。3 加入150μL 5mol
基因组DNA的提取 概 述 基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇，基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出，而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。在提取过程中,染色体会发生机械断裂,产生大小不同的片段,因此分离基因组DNA时应尽量在温和的条件下操
第一节 概 述DNA的提取通常用于构建文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用DNA较长的特性，可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇，的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中，可用玻棒将其取出，而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部，从而达到提取的目的。在提取过程中，染色体会发生机械断裂，产生大小不同的片段，因此分离DNA时应尽量在温和的条件下操作，如尽量减少酚/氯仿抽提、混匀过程要轻缓，以保证得到较长的DNA。一般来说，构建
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