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- Nippon Genetics
- BB01
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- 2025年12月22日
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研卉生物
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120ml
Bambanker细胞冻存液（无血清，适用所有细胞系）
120 ml serum-free freezing media for long storage of cells
Comparative video of preservation efficiency of mouse fibroblast cell line
Bambanker® |
Self-prepared preservative solution (FBS containing 10% DMSO)  实验条件•使用的细胞：小鼠成纤维细胞系（MEF从美国类型培养物收集中获得）•储存的细胞数：4×106个细胞/瓶。每个细胞悬浮在1毫升的防腐溶液中储存温度：-80ºC。电池直接放置在储存盒中，并在不使用BICELL等的情况下冷却。储存期：45天在自制的保存液中观察到大量死细胞和生长潜能停滞；然而，Bambanker®在解冻后立即显示出强大的细胞增殖能力，几乎所有细胞的存活都得到了证实。（有关详细信息，请参阅页面顶部的用户报告） BAMBANKER®是一种无血清培养基，可在-80℃下长期冷冻，并保存有价值的培养细胞，如肿瘤细胞和正常细胞。 <仅供研究使用> 特征 无血清 细胞保存用即用培养基 不需要程序冻结 在深度冷冻柜中快速长期冷冻和保存 可在2～4℃下使用2年 操作程序 对数生长期离心，收集5×105～1×107个细胞。 将收集的细胞悬浮在1mL培养基中，并将细胞置于冷冻管中进行冷冻和保存。然后冷冻并在-80℃下保存细胞，无需预先冷冻。在-80℃下冷冻的细胞可随后在液氮中保存。 解冻必须在恒温室或恒温槽中快速进行。 ★ 细胞必须在对数生长期冷冻。 应用（通过冷冻保存试验保存完好的细胞） P3U1（小鼠骨髓瘤细胞系）・K562（人类白血病细胞系）・人胃上皮细胞 人γδT细胞・Daudi（人类B细胞系）・PC12（大鼠来源的肾上腺嗜铬细胞瘤） 人B细胞系・OKT4（小鼠杂交瘤）・猴细胞系・小鼠胚胎干细胞系 人外周血活化淋巴细胞・小鼠脾活化淋巴细胞 细胞库的建立可为生物制品的生产提供检定合格、质量相同、能持续稳定传代的细胞。 根据 2020版 中国 药典的规定，用于生物制品生产的细胞株应该建立三级细胞库 ，包括 种子细胞库（PCB）、主细胞库（MCB） 及 工作细胞库（WCB） ，并要求细胞冻存后仍具有良好的活力，通过定期取样 复苏 来保证复苏后的细胞活力应不低于8 0 %。 此外，细胞库建立后还应对其可能存在的外源污染因子（包括细菌、真菌、支原体、病毒等）进行全面检定，排除可能存在的潜在污染风险。因此， 选择一款细胞冻存保护性能好、成分明确且满足GMP生产标准的细胞冻存液是满足生物制品用细胞株冻存的理想方案！ Bambanker是一款无血清、无动物源且成分明确的即用型细胞冻存液，适用几乎所有类型细胞株，包括原代细胞、干细胞、淋巴细胞以及常规细胞系等，该产品已在50多个同行评审出版物中被引用，获得全球用户的一致好评。目前，JCRB细胞库用Bambanker冻存超过1400种不同细胞系，冻存超过5年后的细胞复苏活率仍可达到80%以上。相比于传统添加血清的细胞冻存方法，用Bambanker冻存细胞有无法比拟的优势，主要包括：
Bambanker 冻存液不含血清成分。由于血清具有成分不明确、批间差异大等缺点，如果将细胞冻存在含有血清的基质中，不仅会导致细胞复苏活率不稳定，还可能引入其他潜在污染因子。而Bambanker采用了成分明确的化学限定配方，能够在高效保护细胞的同时避免上述潜在风险。 此外，Bambanker 的 生产满足GMP标准， 具备 完善的质量管理体系，保障了产品的一致性、可靠性和高质量。 Bambanker 冻存液不含血清成分。由于血清具有成分不明确、批间差异大等缺点，如果将细胞冻存在含有血清的基质中，不仅会导致细胞复苏活率不稳定，还可能引入其他潜在污染因子。而Bambanker采用了成分明确的化学限定配方，能够在高效保护细胞的同时避免上述潜在风险。 此外，Bambanker 的 生产满足GMP标准， 具备 完善的质量管理体系，保障了产品的一致性、可靠性和高质量。 |
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文献和实验培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
50 代以内的细胞。50 代以后的细胞不建议采用，因为转染效率会随时间的推移而下降。 6.避免使用抗生素 从铺盘直到转染后 72 小时内，应避免使用抗生素。在转染的细胞中，已经显示出抗生素积累到了毒性水平。为获得最佳的siRNA输送效果，某些细胞和转染试剂需要无血清的条件。我们建议在正常的生长培养基和无血清培养基中均做转染试验，以确定每个转染实验的最佳条件。 7.使用优化的试剂转染 siRNA 请使用您的细胞类型适用的最佳 siRNA 转染试剂和试验方案。对于 siRNA 试验，转染试剂的选择
培养基，添加新培养基（50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基）； 3. 阶段培养二：待细胞在梯度培养一中生长汇合度约为 70～80% 时，移去原有的 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基； 4. 使用 1X PBS 溶液将细胞润洗 2～3 次； 5. 加入外泌体专用无血清培养基继续培养 24～48 h，待细胞汇合度到 90%～100% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌体提取实验。 *注：若使用 DMEM、1640 等常规培养基，会导致培养
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