NUNC15ml离心管，无菌袋装

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

-17AC CO2 培养箱 SANYOXTD-10A体视显微镜 芜湖光学仪器厂无菌超净工作台 苏州净化设备厂50ml 细胞培养瓶 NUNC96孔细胞培养板 NUNC24孔细胞培养板 NUNC6 孔细胞培养板 NUNC倒置显微镜 LeicaOLYMPUS荧光显微镜 OLYMPUSOLYMPUS光学显微镜 OLYMPUS方法： 神经干细胞的培养 ①原代细胞的培养：取孕13.5天昆明种二级孕小鼠，引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜，取出子宫,放入盛有D1

快速分离单个核细胞方法总结

                3在1200g条件下离心10分钟； 注意：可延长离心的时间，去除更多的粒细胞，从而获得纯度更高的PBMC； 4离心后，管内样品从上往下分层如下：血浆-白膜层-分离液-隔层-分离液-红细胞沉淀； 5直接将隔板上层液体快速倾倒入另一无菌离心管中(有少许红细胞贴于隔层上方为正常现象，因其离心后贴壁不会随上层液体倾倒出来)； 注意：倾倒隔板上层液体时需迅速，且一次性完成，勿反复倾倒。通常白膜层距离下方隔板尚有一段距离，因此倾倒时也不必将全部上层液体全部倒尽。 6加入PBS

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

科镊子提起腹膜，用 5mL 注射器往小鼠腹腔注射 2.5mL 预冷 PBS（勿扎到脏器），轻揉小鼠腹部1~2 min。注射器回抽腹腔灌洗液，收集于15mL 离心管中。 重复第 5 步 5 次，冲洗腹腔，可观察到冲洗液逐渐澄清。 将收集的腹腔灌洗液 300 g 离心 5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液或者含 10% 胎牛血清的 1640 培养液重悬细胞。 进行细胞计数，并调整细胞浓度至 1×107/mL。 注意事项： 若第 7 步离心弃上清后发现细胞沉淀中有较多红细胞，且检测目的细胞非红细胞，先