25ml血清移液管

细胞培养注意事项（入门级）

达到70－80%就可以传代。早点传代也可以。如果是贴壁生长的细胞：1） 培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液；2） 无菌PBS或无菌生理盐水洗涤3次（按培养体积加入）；3） 加入适量胰酶消化适当时间（一般胰酶为0.25%；9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，一次加入1mL胰酶。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑，一般如果是细胞株，非原代培养，消化1－2分钟足矣）；4） 用枪头吹打数十次（视细胞类型而定。一般细胞株30－50次吧，耗时一般2分钟左右）；5） 加入适量体积完全培养基终止

垂直电泳槽的使用

•如只运行一块凝胶，则需要把胶门（很厚的玻璃板）插入到电极空着的一边。将SDS-PAGE电泳缓冲液倒入凝胶三明治夹与胶门之间，直到缓冲液表面距离玻璃板上缘1cm（图 11）。检查是否有渗漏。将1升的SDS-PAGE电泳缓冲液倒入槽内凝胶组件的周围。 样品制备和装载： •将试管插入至制冷恒温金属浴（4℃），以解冻冷冻牛血清白蛋白（BSA）（1 mg/ml）样品。 然后，加入25μl 4X蛋白染料及75 μl的已解冻牛血清白蛋白溶液。 •把样品加样到凝胶中前, 请在恒温金属浴中以

类器官培养与应用——肺类器官

板置于显微镜下。在不破坏单层细胞的情况下，用移液器吸头轻轻移出自由漂浮的球体，并将其转移到 1.5ml 的离心管中。让球状体在离心管底部沉降 5-10 min，必要情况下可以用微量离心机低速离心 10s。 9、将吸出的球体接种于 200μl  含蛋白浓度 8.0mg/ml 的 Matrigel 胶中，轻轻吹打混匀，迅速操作并防止气泡产生。 10、在 24 孔板的每个培养孔中心接种 25μl  混合液，放入 37℃ 培养箱中静置 10min。待 Matrigel 凝固后，加入 0.5ml hLOs