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- 考马斯亮蓝染色
- 江苏南京
- 2025年12月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
考马斯亮蓝染色
- 提供商：
凯基生物
| 考马斯亮蓝染色 | |
| 实验目的：染色丙烯酰氨凝胶和琼脂糖凝胶中的蛋白质 实验原理：凝胶中的蛋白质须经过染色才能肉眼看见，染色的方法有染料染色法和金属染色法。考马斯亮蓝染色法是染料染色法的一种，可在微克水平检测出凝胶中的蛋白。考马斯亮蓝染色法须在酸性条件下进行，染料分子与蛋白质上的氨基才能形成牢固的电荷吸引力。其染色效果与考马斯亮蓝的浓度、蛋白质中所含的赖氨酸、组氨酸和精氨酸的分子数呈正相关关系，同时与蛋白质的含量呈线形关系 实验材料： 试剂：全蛋白提取试剂盒、Bradford法蛋白定量试剂盒、上样缓冲液、考马斯亮蓝染液、考马斯亮蓝脱色液。 仪器：摇床、恒温箱、蛋白电泳仪。 实验内容与方法： 1、根据需要选择是否做蛋白提取步骤。 2、蛋白含量测定。 3、配胶，上样电泳。 4、考马斯亮蓝染色脱色。 客户提供实验信息： 1、实验信息（客户提供）： 样本名称与来源： 样本数量：__________ 2、实验材料提供： 样本材料（客户提供，运送方法见P）： 新鲜或冷冻细胞不少于106个，新鲜或冷冻组织样本不少于50 mg。 已提取的蛋白样品蛋白含量不低于0.1ug/ul。 服务周期：（2到8周，根据样本数量而定） 结果提交：提交实验报告书（包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析）、原始数据、图片，文本或电子版。 |
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文献和实验相关实验
用考马斯亮蓝 R － 250 染色 1． 凝胶的固定液中轻微摇荡至少 1 小时。 2． 凝胶在染色液中摇荡过夜或至少 1 小时。 3． 胶在脱色液中摇荡过夜或至少 1 小时以消除背景。 4． 凝胶放于保存液中至少 4 小时以进一步脱色。在最初的 1 小时内换两次溶液
85％(w／V)的磷吱l00m1．加水定容到1L (一)标准曲线的绘制 在试管中分别加入含0、10、20、30、40、50、60ug标准蛋白质溶液，用水补足到60ul，加3m1染色液，混匀后室温放置15分钟，至595nm处比色测定。以蛋白质含量为横坐标，A595的值为纵坐标绘制标准曲线。 (二)测定 取未知浓度的样品60ul，同上测定，从标准曲线上查出相应的含量。 该方法反应快、操作简便、消耗样品少，但不同蛋白质间的差异大，标准曲线的线性不好，显色受时间和温度影响较大。考马斯亮蓝染色
HE&尼式染色.pdf
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