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| 别名: | 碱性橙14,3,6-双(二甲氨基)吖啶 |
| CAS号: | 10127-02-3 |
| 分子式: | C17H20ClN3 · HCl · 1/2ZnCl2 |
| 分子量: | 369.96 |
| EINECS编号: | 233-353-6 |
| MDL号: | MFCD00081043 |
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| 介绍: | 溶于水、乙醇。溶液为橙黄色带绿色荧光。pH值为8.4~10.4则无荧光。能镶嵌于两个相邻的碱基对之间,使部分双螺旋DNA松开,该两个碱基对的距离拉大一倍。这样的DNA复制过程中,会使DNA链增加或缺失一个碱基,造成移码突变。Colour Index Number 46005 |
| 用途: | 用作荧光指示剂,肿瘤细胞及细菌、核酸染色剂及移码突变的诱变剂。 吖啶橙是一种荧光色素,吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光(即着色特异性),这是由于DNA是个高度聚合物,吸收荧光物质的位置较少,发绿色荧光,而RNA聚合度低,能和荧光物质结合的位置多,故发红色荧光。 |
| 特定比重: | 2.54 |
| 敏感性: | 易吸潮 |
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文献和实验成份: L-半胱氨酸 0.25克 葡萄糖 6克 胰蛋白胨 17克 大豆胨 3克 硫乙醇酸钠 0.1克 氯化钠 2.5克 亚硫酸钠 0.1克 琼脂 0.7克 DW 1000毫升 调PH7.6,11磅高压15分钟. 附:V—KL添加剂: 液体培养基0.1ug/毫升或0.1单位/毫升.固体培养基最终浓度10ug/毫升,冷却后再加VitKL.
AO 染色法(丫啶橙染色法)检测细胞凋亡 【材料与试剂】 pH4.8~6.0 Tritionx-100的PBS缓冲液, AO染料:将AO染料溶于含1%TritionX-100的PBS中,终浓度为6μg/ml,含Rnase100μg/ml,避光保存。 荧光显微镜 【操作方法】 制备活细胞悬液106 /ml; 取95μl细胞悬液,加5μl的AO染液混合、避光作用10min; 加入5ml PBS,1500r/min离心5min,弃上清,重复洗涤2次; 重悬
将细胞悬液与DNA结合的荧光染料混合,应用荧光显微镜观察以显示和计数伴有异常染色质的组织细胞。常用染料为丫啶橙,染色后可以检测整个细胞群中有多少细胞发生了凋亡,但不能区别活细胞和死细胞。因此将丫啶橙和溴化乙啶混合使用,根据两种染料的吸收情况可鉴定死、活细胞。 一、材料与试剂 100μg/ml丫啶橙或100μg/ml丫啶橙与100μg/ml溴化乙啶的混合物:分别用PBS配制(两种染色剂均系诱变物,操作时应十分小心)。 用完全RPMI-1640培养液配制的细胞悬液,浓度为5×
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