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96T/48T
人含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒说明书的时候你不是也非常的惊讶,这实验的原理竟这么简单。然而这实验的过程中的那么几个看似平凡的操作,没做到位的话甚至会毁了整个实验,您可别小看了ELISA实验。通过我公司技术人员的总结。
海信裕生物科技有限公司悄悄告诉你:使用ELISA试剂盒要的四个方面。
第一、看似无聊实则重要的洗涤: 如果未结合的材料残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。有必要的话,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,而您怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。
第二、关键的封闭:封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高,怀疑封闭不充分,那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰,那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和人含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。最常用的非离子型去污剂是Tween-20(恒远生物的吐温-20第二季度的新货已经上市啦,需要的来电咨询哦!)。这种封闭液便宜、稳定,在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用,因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度,它会降低特异结合,产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液,后者可协助洗涤过程中的封闭。蛋白封闭液则有所不同,是永久的。它们与开放位点结合并封闭,同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白(BSA)、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过,它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。
第三、抗体浓度须优化: 如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。
第四、检测试剂要适量:切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高,或者未正确稀释,则会导致高背景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入终止液。如果您的人含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒不幸地遇到了高背景,那么也无需太担心,依次查看ELISA系统中的组分,并排除可能存在的问题。悉心优化,相信很快就会有漂亮的结果。
人含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒公司同期促销产品:CCC-HEL-1 人胚肝二倍体细胞
CCC-HHM-2 人胚心肌组织来源细胞
CCC-HIE-2 人胚肠粘膜组织来源细胞
CCC-HPE-2 人胚胰腺组织来源细胞
CCC-SMC-1 兔主动脉平滑肌细胞
293001A Sars蛋白表达株
293001B Sars蛋白表达株
293sars181A Sars蛋白表达株
A-204 人横纹肌肉瘤
A375 人皮肤黑色素瘤细胞
A431 人皮肤基底细胞癌
A549 人肺癌细胞
A875 人黑色素瘤细胞
BeWo 人胎盘绒毛癌细胞
BGC-823 人胃腺癌细胞
BT474 人乳腺导管瘤
CACO-2 人结肠癌细胞
CaLu-3 人肺腺癌细胞
CASKI, 人宫颈癌
Colo205 人结肠癌
Colo320DM 人结肠癌
D341 Med 人髓母细胞瘤
Daudi 人B淋巴细胞瘤
DU145 人前列腺癌细胞
G-401 人肾癌Wilms
GLC-82 人肺腺癌细胞
HCT116 人结直肠癌
HCT-8 人结肠腺癌
HEC-1B 人子宫内膜癌细胞
Hela 人宫颈癌细胞系
Hep G2 人肝癌细胞
Hep-2 人喉癌细胞
HL-60 人白血病细胞
HOS 人骨肉瘤细胞
HT-1080 人纤维肉瘤
HT-29 人结肠腺癌细胞
HuTu-80 人十二脂肠腺癌
JEG-3 人绒癌细胞
JEG-3/VP16 人绒癌细胞VP16耐药株
JEG-3/VP16-IL-2 人绒癌细胞VP16耐药株IL-2转染
JEG-3/VP16-TNFa 人绒癌细胞VP16耐药株TNFa转染
Jurkat E6-1 人T细胞淋巴瘤
Jurkat77 人T淋巴瘤细胞亚系
K562 人红白血病细胞
KB 人口腔上皮癌
LNCaP 人前列腺癌(B类)
LoVo 人结肠癌
M17 人神经母细胞瘤
M2 待查
MCF7 人乳腺癌细胞
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第一、看似无聊实则重要的洗涤: 如果未结合的材料残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。有必要的话,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,而您怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。
第二、关键的封闭:封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高,怀疑封闭不充分,那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰,那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和人含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。最常用的非离子型去污剂是Tween-20(恒远生物的吐温-20第二季度的新货已经上市啦,需要的来电咨询哦!)。这种封闭液便宜、稳定,在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用,因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度,它会降低特异结合,产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液,后者可协助洗涤过程中的封闭。蛋白封闭液则有所不同,是永久的。它们与开放位点结合并封闭,同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白(BSA)、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过,它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。
第三、抗体浓度须优化: 如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。
第四、检测试剂要适量:切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高,或者未正确稀释,则会导致高背景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入终止液。如果您的人含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒不幸地遇到了高背景,那么也无需太担心,依次查看ELISA系统中的组分,并排除可能存在的问题。悉心优化,相信很快就会有漂亮的结果。
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G-401 人肾癌Wilms
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JEG-3 人绒癌细胞
JEG-3/VP16 人绒癌细胞VP16耐药株
JEG-3/VP16-IL-2 人绒癌细胞VP16耐药株IL-2转染
JEG-3/VP16-TNFa 人绒癌细胞VP16耐药株TNFa转染
Jurkat E6-1 人T细胞淋巴瘤
Jurkat77 人T淋巴瘤细胞亚系
K562 人红白血病细胞
KB 人口腔上皮癌
LNCaP 人前列腺癌(B类)
LoVo 人结肠癌
M17 人神经母细胞瘤
M2 待查
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