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96T/48T
海信裕生物科技有限公司悄悄告诉你:使用ELISA试剂盒要的四个方面。
第一、看似无聊实则重要的洗涤:如果未结合的材料残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。有必要的话,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,而您怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。
第二、关键的封闭:封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高,怀疑封闭不充分,那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰,那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和小鼠抗缪勒管激素(AMH)检测试剂盒。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。最常用的非离子型去污剂是Tween-20(恒远生物的吐温-20第二季度的新货已经上市啦,需要的来电咨询哦!)。这种封闭液便宜、稳定,在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用,因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度,它会降低特异结合,产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液,后者可协助洗涤过程中的封闭。蛋白封闭液则有所不同,是永久的。它们与开放位点结合并封闭,同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白(BSA)、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过,它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。
第三、抗体浓度须优化:如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。
第四、检测试剂要适量:切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高,或者未正确稀释,则会导致高背景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入终止液。如果您的小鼠抗缪勒管激素(AMH)检测试剂盒不幸地遇到了高背景,那么也无需太担心,依次查看ELISA系统中的组分,并排除可能存在的问题。悉心优化,相信很快就会有漂亮的结果。
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文献和实验人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)酶联免疫分析(ELISA)
人缪勒管抑制物质/ 抗缪勒管激素(MIS/AMH) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中缪勒管抑制物质/ 抗缪勒管激素(MIS/AMH) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 人缪勒管抑制物质 / 抗缪勒管激素 (MIS/AMH) 水平。用纯化的 人缪勒管抑制物质 / 抗缪勒
大鼠抗缪勒管激素(AMH) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中抗缪勒管激素(AMH) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中大鼠抗缪勒管激素 (AMH) 水平。用纯化的大鼠缪勒管激素抗原 包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗缪勒管激素 (AMH) ,再与 HRP 标记的缪勒管激素
、黑曲霉等。 侵袭性曲霉菌感染通常发生于免疫缺陷、移植或高剂量服用激素治疗的患者,如恶性血液病,器官移植, 造血 干细胞 移植,移植物抗宿主疾病等。近些年研究报道的数据显示,侵袭性曲霉菌病的发病率和死亡率已高达58%,严重威胁了患者生命。所以IA的早期诊断是预防病情和及时治疗的关键。 半乳甘露聚糖(Galactomannan,简写GM)是曲霉菌 细胞 壁上特有的多糖成份,当机体感染时,菌丝生长,半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放出来,是最早释放的抗原。GM抗原检测是EORTC
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