- ￥2920
- GBICO
- 17104019
- 美国
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
北京拜尔迪诊断技术有限公司
- 英文名：
Collagenase, Type IV, powder
- 规格：
1 g
IV型胶原酶推荐用于胰腺组织和胰岛的分离。
胶原酶是一种蛋白酶，能够特异性地结合Pro-X-Glyc-Pro序列中中性氨基酸 (x) 和甘氨酸之间的肽键。该序列高频率地存在于胶原中。胶原酶是唯一一种可以降解广泛存在于结缔组织中具有三股螺旋的天然胶原纤维的蛋白酶。
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文献和实验蛋白沉淀出来。经硫酸铵分级盐析将胰蛋白酶原、胰凝乳蛋白酶原和弹性蛋白酶原沉淀。沉淀物经水溶解并调至pH8.0，用极少量的胰蛋白酶将胰蛋白酶原激活，同时溶液中的胰凝乳蛋白酶原和弹性蛋白酶原也被激活，三种酶原相互作用过程如下： 也可采用从胰脏中提取出胰蛋白酶原，利用合适的提取溶液的pH值促使胰蛋白酶原部分自溶，并通过溶液中Ca2+的环境，使胰蛋白酶原被开始自溶的少量具有活性的胰蛋白酶所激活，转变为具有活性的胰蛋白酶（胰凝乳蛋白酶原及弹性蛋白酶原亦同时被胰蛋白酶激活成有活性的酶
以下是我最近在分离枯否细胞时得出的一点个人经验，仅供大家交流： 1，严格的无菌原则 2，充分的麻醉效果 3，开腹前腹腔注射肝素形成全身肝素化 4，插管前先将前灌流液及IV型胶原酶预热37度 5，先分离门静脉,肝动脉及下腔V，结扎肝A，在门静脉下穿两根线 6，门静脉插管双重结扎，以防分离肝脏时硅胶管脱落 7，插管成功后，剪断下腔静脉放血，肝脏在体灌注前灌流液20ML/MIN,20MIN 8,肝脏变白后，小心将肝脏游离出腹腔，置无菌瓶皿中，改用IV型胶原
中含有丰富的收缩蛋白和结缔组织，以及干扰 RNA 分离的胶原蛋白。 解决方案 1. 对于含有丰富的收缩蛋白和结缔组织，组织细胞密度低，其中 RNA 含量较少，可以适当增加材料的起始用量。 2. 务必要在低温冷冻条件下将组织彻底磨碎，并尽量尽快研磨成粉末状。 3. 用蛋白酶或含有苯酚的试剂处理样本。 内源性 RNase 含量高的组织如肾脏、肠、脾脏、胸腺以及胰腺 该类样本中 RNase 含量很高，提取过程中很容易发生 RNA 的降解。 解决方案 1. 尽量使用新鲜组织，采样不宜太大，尽可能缩短
