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南京赛泓瑞
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100 ML
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文献和实验Rosa26-EYFP(CD4/EYFP)小鼠脾细胞中观察到,未经处理的活细胞EYFP荧光信号最强;然而,使用FoxP3染色试剂盒(含Fix/Perm和Perm两步法)后,EYFP荧光几乎完全消失。值得注意的是,若在标准染色流程前先用2%多聚甲醛(PFA)进行预固定,则EYFP信号可有效保留。 这一现象表明,荧光丢失并非源于荧光蛋白的化学降解,而是由于Fix/Perm缓冲液固定能力不足,导致可溶性胞质EYFP在后续破膜和洗涤步骤中被被动洗脱出细胞。 怎样解决
image of a whole mount from a 4 wk old virgin Protocol Spread tissue on glass slide Fix in Carnoy's fixative for 2 to 4 hours at r.t. Wash in 70 % EtOH for 15 min Change gradually to distilled water
DETECTION OF ß-GALACTOSIDASE AND ALKALINE PHOSPHATASE ACTIVITIES IN TISSUE
-treatment conditions.Histochem . J. 18 :271. Rodriguez, J., and F. Deinhardt. 1960. Preparation of a semipermanent mounting medium for fluorescent antibody studies. Virology 12 :316. Rosenberg, W.S., X.O. Breakefield, C. DeAntonio, and O
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