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G-alpha(o) Antibody (IP Preferred)
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文献和实验,该对照组称为output 组。 内源性 co-IP 实验,如果最终结果为阳性,则可以证明两个蛋白之间存在相互作用;但是结果为阴性,是否两个蛋白就一定不发生相互作用了了呢?也不一定。有可能是两个蛋白是弱相互作用力,这时候可能需要交联剂协助,锁定强化弱互作蛋白;也有可能是内源蛋白表达量低,可先做过表达 co-IP 作为对照。 实验前的思考 1、抗体----选经过 IP 验证的抗体,减少假阳性概率 2、抗体结合蛋白---Protein A, Protein G, Protein A/G, Protein
IP Issues in the Therapeutic Antibody Industry
The following section is related to IP issues in the therapeutic Antibody industry. A rough overview over protected enabling techniques and compounds is provided, in order to facilitate the entry into freedom to operate studies. Furthermore
一、原理: 免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)技术是检测蛋白质间相互作用的经典方法,基本原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成;随后加入能够与抗体Fc段结合的proreinA/G(预先结合固化在琼脂糖小珠上),形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-proteinA/G小珠”复合物,纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白,应用Westernblot或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。 与其它研究方法相比,免疫
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