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- 文献和实验
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100
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上海远慕生物
- 英文名:
无
- 规格:
1ml/10ml
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文献和实验液,pH7.4,含1%BSA和0.1%叠氮钠)4℃,孵育过夜 ⑤彻底清洗,应用0.5mol/L Tris缓冲液pH7.2,不含BSA ⑥继之用0、5mol/L Tris缓冲液pH7.6,含1%BSA冲洗 ⑦0、5mol/L Tris缓冲液pH8.2,含1%BSA,室温孵15min ⑧羊抗兔IgG标记以15nm金粒,应用0.5mol/l Tris缓冲液pH8.2、含1%BSA稀释1:40,孵育2h,室温 ⑨0、5mol/L Tris缓冲液pH7.4 冲洗 ⑩蒸馏水冲洗 (2)镍网面B,重复
-20℃保存。 为最大限度保持抗体活性,整个过程应在4℃下进行。对于冻干抗血清或长时间保存的血清,将生理盐水透析改为3 M KCNS透析,促使聚合的多聚体解聚。如果抗血清效价较低时,不宜准备胶体金探针。 2、亲和纯化抗体的处理 亲和纯化抗体多是一些商品化的通用抗体,即二抗。一般为羊抗兔、羊抗鼠或羊抗人的抗体。这些抗体一般有两个问题,一是IgG分子往往聚集为多聚体分子,二是往往含有较多的盐分。因此前处理的目的在于脱盐和解聚。 其基本步骤如下: (1) 将亲和纯化抗体用生理
缓冲液pH7.6,含1%BSA冲洗 ⑦0、5mol/L Tris缓冲液pH8.2,含1%BSA,室温孵15min ⑧羊抗兔IgG标记以15nm金粒,应用0.5mol/l Tris缓冲液pH8.2、含1%BSA稀释1:40,孵育2h,室温 ⑨0、5mol/L Tris缓冲液pH7.4 冲洗 ⑩蒸馏水冲洗 (2)镍网面B,重复①~⑩,只在第④时更改另一特异性一抗,在⑧时羊抗兔IgG标记以5nm金粒。 (3)铀铅双重染色,电镜
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