羊抗兔IgG(H+L)（兔IgG亲和纯）/GoatAnti-

捕获ELISA法

第1节- 试剂1.1涂层缓冲液PBS（137 mM氯化钠，2.7 mM的氯化钾，8.1 mM的磷酸氢二钠，1.5 mM磷酸二氢钾）1.2封闭液5％脱脂乳于PBST中（0.05％Tween-20）1.3稀释剂2％脱脂乳于PBST中（0.05％Tween-20）1.4柠檬酸缓冲液3.65克柠檬酸，4.76克磷酸氢二钠，溶解于500毫升双蒸水1.5兔抗GST抗体兔抗GST抗体1.6 HRP结合山羊抗兔IgG（H + L）山羊抗兔IgG（H + L），結合过氧化物酶第2节- 分析方法注：以下方法是一个

Western Blot实验准备与步骤

一、材料和方法1．试剂及耗材蛋白抽提试剂（改进型RIPA配方）BCA蛋白定量试剂盒5×还原样品缓冲液10×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液考马斯亮蓝染色液10×TBST pH8.0湿转缓冲液PVDF膜，0.22um孔径丽春红染色液PMSF蛋白酶抑制剂封闭液ECL发光液山羊抗兔IgG（H+L），HRP兔抗山羊IgG（H+L），HRPβ-actin 鼠单抗2．实验仪器Fresco低温冷冻离心机MultiSkan3酶标仪电泳槽湿转电泳槽电泳仪水平脱色摇床 二、 实验方法及结果3.1细胞

免疫电镜胶体金标记法

液，pH7.4,含1%BSA和0.1%叠氮钠）4℃，孵育过夜 ⑤彻底清洗，应用0.5mol/L Tris缓冲液pH7.2,不含BSA ⑥继之用0、5mol/L Tris缓冲液pH7.6,含1%BSA冲洗 ⑦0、5mol/L Tris缓冲液pH8.2,含1%BSA，室温孵15min ⑧羊抗兔IgG标记以15nm金粒，应用0.5mol/l Tris缓冲液pH8.2、含1%BSA稀释1：40，孵育2h，室温 ⑨0、5mol/L Tris缓冲液pH7.4 冲洗 ⑩蒸馏水冲洗 （2）镍网面B，重复