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SP6/T7 Transkription Kit
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嵘崴达
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2 x 20 assays
SP6/T7转录试剂盒
SP6/T7 Transcription Kit
别名: RNA标记,放射性, 转录试剂盒sp6/t7
样品材料
DNA插入转录载体pSPT18或pSPT19中。模板DNA必须在转录反应前用合适的限制酶进行线性化,以获得具有确定长度的转录物。使用完整的质粒DNA作为转录模板将会产生具有多个质粒长度的异质转录物。
Specificity
热灭活:通过加入2μl 0.2MEDTA(pH8.0)和/或加热至65℃ 10分钟来终止反应。
Application
通过SP6和T7聚合酶的 体外转录,对RNA进行放射性或非放射性标记的便捷试剂盒。该试剂盒也可用于“冷”转录检测。通过体外转录方法产生已知长度的单链RNA探针,其可用于多种杂交技术。
用于对克隆于SP6或T7启动子下游的DNA序列进行体外转录。 可以使用放射性(例如,32P、3H、35S)标记的或非放射性的(例如,洋地黄毒苷或生物素)标记的核糖核苷酸以高效率(60-70%掺入)合成均一标记的RNA。 标记的转录本适用于所有DNA和RNA杂交技术,也可用于基因组测序和S1核酸酶研究。使用SP6/T7系统可以合成大量高纯度的RNA。这些转录本可用于RNA加工系统的研究。合成的RNA可以在注射到卵母细胞后在体外或体内进行翻译。通过引入“反义”-RNA可以抑制确定的mRNA的转录。通过引入帽结构可以显著增加合成mRNA的体内 翻译效率。
| 10999644001 | SP6/T7 Transkription Kit | 1 kit (2 x 20 transcription reactions) | |
| 3143414001 | Genopure Plasmid Midi Kit 质粒抽提试剂盒 | 1 kit (for up to 20 preparations) | |
| 11636138001 | PCR Optimization Kit 优化PCR试剂盒 | 1 kit | |
| 4983955001 | High Pure PCR Cleanup Micro Ki | 1 kit (up to 50 purifications) | |
| 11526537910 | RNA-Lenght-standards II DIG 2 | 2 µg (200 µl) | |
| 11373099910 | RNA Mol.Weight Marker III, DIG | 2 µg (200 µl) |
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文献和实验人转录因子E2F1 ( E2F1 )ELISA 试剂盒 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 E2F1 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 E2F1与单抗结合,加入生物素化的抗人 E2F1 ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在 450nm 处测 OD 值,E2F1 浓度与 OD 值成正比
。) 使用不同的聚合酶 通常用于体外转录的三种 RNA 聚合酶可以相互不同地转录给定的模板。当转录不能完成时,可以充分利用这种转录给定模板序列的不同能力。改变转录模板前面的聚合酶启动子序列是一种劳动密集型修复,因为它可能需要设计 PCR 引物或亚克隆。Ambion 具有可简化过程的载体和引物。pTRIPLEscript 系列载体具有串联排列的 SP6、T7 和 T3 启动子,这些载体特别适用于亚克隆转录模板。或者,Ambion 的无克隆启动子添加试剂盒 Lig'nScribe 可用于改变可 PCR 扩增
如果您需要制备RNA探针的话,推荐您使用Northern Starter Kit。该试剂盒以线性的DNA为模板,通过SP6, T7或是T3 RNA聚合酶的作用将DIG-11-UTP掺入到转录的RNA中,借助化学发光底物CDP-Star检测。另一个产品DIG RNA Labeling Kit也可用于RNA探针的标记。 末端标记寡核苷酸Oligonucleotide
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