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- 英文名:
COT Human DNA
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需确认
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嵘崴达
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见产品外包装
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−20°C
- 规格:
500 µg
COT人源DNA
COT Human DNA
from human placenta DNA, enriched for repetitive sequences
General description
人基因组DNA的COT部分主要由快速退火的重复序列组成。SINE(小散在重复序列,例如Alu序列)和LINE(大散在重复序列,例如L1序列)等散在重复序列(IRS)在整个基因组中广泛分布。在富含这些重复序列的条件下,通过剪切、变性和再退火,由人胎盘DNA制备人COT DNA。
探针中存在的重复序列(IRS)(例如粘粒、YAC、染色体涂染探针)可产生分布在整个染色体或基因组上的非特异性杂交信号。为了使探针与染色体靶位点发生特异性杂交(例如单拷贝序列或低拷贝重复序列),必须在过量的未标记的人COT DNA存在下使探针变性。这是竞争性DNA。在随后的预退火步骤中,探针重复序列迅速与人COT DNA中的多余重复序列杂交,而大多数特异性探针序列仍是单链,因此可以与其染色体靶标杂交。这项技术称为染色体原位抑制(CISS)杂交。
Application
人COT DNA可用于染色体原位抑制(CISS)杂交。粘粒或YAC探针含有重复序列,其产生分布在整个染色体上的单特异性杂交信号。为了能与染色体靶位点发生特异性杂交,将探针与过量的未标记的竞争性人COT DNA一起变性。在微阵列分析、滤光片和荧光原位杂交实验中,人COT DNA可用于抑制与人重复序列发生非特异性杂交。
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文献和实验在两条具有互补碱基顺序的两个单链DNA 之间,根据重组为双链分子速度的分析来确定 DNA 碱基排列的复杂程度和排列折返频度,这种分析方法称为 Cot 分析。其反应速度与 DNA 的浓度成正比。若 DNA 样品中碱基顺序有重复,则重组速度就与重复频率成正比地增加。 1968 年 R.J.Britten 和 D.E.Kohne 按此原理,作为对含大量各种碱基重复序列的高等生物 DNA 结构分析的一种手段,提出了 Cot 分析。设 DNA 浓度为 C ,反应时间为 t ,速度常数为 K
FISH With and Without COT1 DNA
two protocols: the first one describes rapid COT DNA isolation and the peculiarities of its use in different FISH experiments, and the second is used for COT-free FISH with complex probes and is based on a special software tool for image enhancement.
Preparation of Sonicated Human DNA
Purpose: To break up high molecular weight human placental DNA into fragment sizes of 500 bp or less which can be used as competitor DNA in Southern and in situ hybridizations. This method can also be used for sonicating salmon
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