- ￥4653
- roche
- 4710444001
- 2025年11月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
见产品外包装
- 英文名：
FastStart PCR Master
- 库存：
需确认
- 供应商：
嵘崴达
- CAS号：
见产品外包装
- 保存条件：
−20°C
- 规格：
8 X 1.25 ML
FastStart ™ PCR启动酶
sufficient for ≤100 reactions (04710436001), sufficient for ≤400 reactions (04710444001), sufficient for ≤2,000 reactions (04710452001)
别名:
PCR | 预混液
一般描述
FastStart™ PCR预混液，一种双倍浓缩的即用型热启动混合液，让热启动聚合酶链式反应(PCR)可以轻松进行。预混液含有FastStart Taq DNA聚合酶、罗氏PCR级优质核苷酸，以及在热循环仪上进行PCR和2步法逆转录酶(RT)-PCR的其他所有必需试剂。
FastStart™ PCR预混液适用于修饰核苷酸，如di高辛(DIG)-dUTP。通过将终浓度为10 μM的修饰核苷酸添加到反应终体积中，可实现DIG-dUTP标记。
将预混液与罗氏Transcriptor第一链cDNA合成试剂盒结合，可获得优异的两步法RT-PCR结果。
应用
FastStart™ PCR预混液已用于通过聚合酶链式反应(PCR)法分析微孢子虫DNA、PCR法验证基因组DNA、、PCR法扩增RNA。
FastStart™PCR预混液是将多个单样试剂混而为一的便捷替代品，几乎适用于所有热启动PCR应用。它可用于扩增长达2kb的基因组DNA和cDNA或更长的质粒DNA目标片段，兼具高特异性、灵敏度和产量。在设置PCR过程中，酶在+15至+25°C范围无活性，然后在初始变性期间的+ 95°C条件下活化。它可用于：
- 热启动 PCR 达 2kb
- 热启动 RT-PCR 达 2 kb
- 高通量 PCR
- 直接菌落 PCR
特点和优势
FastStart Master已修饰重组FastStart Taq DNA聚合酶，在低于+ 75°C的温度下无活性。该试剂盒还包含优化的PCR缓冲液和富含 GC 的溶液，用于处理各种模板。
- 更高的特异性、灵敏度和产量：
热启动 PCR 使 PCR 设置更容易。
- 使用机器人设置。
使用该 enyzme 混合物，在 + 15℃ 至 + 25℃ 下可稳定 24 小时。
- 缩短设置时间。
将主混合物储存在 + 2 至 + 8°C 条件下，可立即使用长达一个月。
| 4710444001 | FastStart PCR Master 10 ml | 8 x 1.25 ml (for 400 reactions of 50 µl final reaction volume) |
| 11732676001 | HP PCR Product Purification Ki | 1 kit (250 purifications) |
| 11754785001 | HP Plasmid Isolation Kit, 250 质粒提取试剂盒 | 1 kit (250 purifications) |
| 10102121001 | Adenosine Deaminase (ADA), sus 腺苷脱氨酶 | 10 mg (1 ml) |
| 11119915001 | RNase, DNase-free 核糖核酸酶 | 500 µg (1 ml) |
| 11775367001 | Uracil-DNA Glycosylase,Heat-la 尿嘧啶DNA糖基化酶 | 100 U |
| 10105589001 | GPT, 10 mg | 10 mg (1 ml) |
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文献和实验Invitrogen 性能卓越的系统整合了可以利用的最好的RT技术，包括SuperScript™ III RT和最新推出的Thermo-X™ RT。SuperScript™ III RT是M-MLV RT基因工程升级版本，减少了RNaseH活性，提供更高的热稳定性（1-3）。这种酶可以在高达55℃的情况下合成cDNA，比以前使用的反转录酶提供更高的特异性，更高的cDNA产量以及更多的全长产物。Thermo-X™ RT克隆自一种嗜热真细菌，提供高达70℃的热稳定
37°C-50°C ThermoScript™ RT 42°C-65°C RNA在高于65℃时开始水解，对于≤1kb的RNA第一链合成温度可以为70℃，对于＞1kb的RNA则需要＜65℃。 Tth热稳定聚合酶在Mg 存在条件下 作为DNA聚合酶，在Mn 存在条件下作为RNA聚合酶。它可以在最高65℃条件下保温。然而，PCR过程中Mn 的存在会降低忠实性，这使得Tth聚合酶不太适合用于高精确度的扩增，如cDNA的克隆。另外，Tth的逆转录效率较低，这会降低灵敏
光信号的收集，这是我们荧光定量 PCR 反应的关键。而同样的我们需要在哪一步来收集信息呢？其实我们只需要在扩增循环中的退火或延伸步骤采集荧光即可（图 8）。 图 8 退火/延伸步骤采集荧光信号 不正确的信号采集同样会造成扩增曲线的异常。如下图所示，客户使用 QuantStudio™ 6 仪器开展实验，实验结束后发现扩增曲线不显示且多组分图表现异常（图 9A，9B），更进一步排查其反应程序设置可以发现，在扩增循环阶段除了在退火/延伸步骤收集荧光外，95℃ 变性步骤的荧光采集开关也被打开了（图 9C
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