Klenow酶-Klenow Enzyme

Klenow酶

Klenow Enzyme

Sequencing grade, from Escherichia coli Iysogenic for NM 964

Application

Klenow酶已用于将recyclin-1（RCY1）基因钝端连接到pETDUET-GSTHis6-S Tag载体中。

Quality

功能测试：根据Sanger在测序反应中对测序级Klenow酶进行测试。用1单位酶和M13测序系统进行测试。通过放射自显影检查测序凝胶。可读序列必须是≥250碱基。

无污染物：已经在各种DNA底物上对测序级Klenow酶进行了测试，确保不存在非特异性内切核酸酶和核酸外切酶。

Unit Definition

一个酶活性单位是指在以下测定条件下，在30分钟内将10 nmol总核苷酸掺入酸可沉淀组分中所需的酶量：
孵育缓冲液
130 mM磷酸钾，6.5 mM MgCI₂，33 μM ¹⁴C-dTTP，poly[d(A-T)]，0.833 A₂₆₀/ml；dATP，33 μM；1 mM二硫赤藓糖醇；牛血清白蛋白，0.032 mg/ml；pH 7.4。
孵育步骤
在+37 °C下，将0.05至0.25单位的酶在总体积为300μl的培养缓冲液中孵育30分钟。

体积活性：根据Richardson（+ 37°C，以poly [d（A-T）]作为引物），分别为1,000单位/ml或5,000单位/ml。

Physical form

酶溶液，5U/μl，溶液储存缓冲液中：
50 mM 磷酸钾，1 mM二硫赤藓糖醇，甘油，50% (v/v)；pH 7.0 (4°C)

10104531001	Klenow Enzyme, Sequencing Grad Klenow酶	250 U (5 x 103 U/ml)
3300242001	Expand HiFi Plus PCR Sys., 125	125 U
10103241001	Carnitine Acetyltransferase 肉碱乙酰转移酶	5 mg (1 ml)
3734927001	Taq DNA Polym. GMP Grade, 5 U/ DNA聚合酶	1,000 U
11585398001	Chromozym TH	100 mg
10127841001	3-HBDH, Grade II	25 mg (5 ml)
11734334001	Universal Protease Substrate, 通用蛋白酶底物	40 mg