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Neon™ 转染系统 10 µL 试剂盒专门设计与 Neon™ 转染系统配合使用。使用该试剂盒可转染 10 µL 的体积,含有 5 × 104–2 × 105 个贴壁细胞或 1 × 105–5 × 105 个悬浮细胞。采用随附的 10 µL Neon™ 吸头进行转染的细胞可直接洗涤并接种到多孔培养皿中。
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文献和实验转染小分子RNAInvivofectamine 2.0和Neon系统
方法毒性较大,诱导细胞膜 上形成孔的电脉冲会杀死一定比例的细胞,因此,每次实验都需要一定量的细胞。 为了克服这些问题,Invitrogen 2009年推出了Neon系统。与传统的电穿孔仪器相比,它的独特之处在于用一个特别的移液器吸头取代了传统的电击杯。这样流程就简化了:只需将细胞和核酸吸入Neon™ 移液器吸头中,再插入到移液器吸头架上,即可开始。据Invitrogen介绍,由于电极的独特设计,表面积比标准电击杯要小,因此电穿孔更为温和,细胞存活率也更高。 目前
RNAiMAX,将两者混合,室温下孵育10-20分钟。加入培养细胞中,在37°C孵育24-48小时。 Lipofectamine® RNAiMAX的价格约为:4315元/0.75 ml,7410元/1.5 ml。最新推出的0.1 ml小包装价格为738元。虽然目录价看上去贵一些,但实际用量较省(24孔板的每孔建议用量为1 μl),因此综合来看性价比较高。 如何对付百毒不侵的细胞——Neon转染系统 就普通的细胞系而言,传统的转染试剂大多都能实现高效的转染
使用Lipofectamine™2000转染Stealth™ RNA或者siRNA进入哺乳动物细胞
推荐使用试剂的量和体积。使用推荐量的Stealth™ RNA或者siRNA(参看第4列)和Lipofectamine™ 2000(参看第6列)作为实验的起始点,针对您的细胞系和目的基因优化条件。注:20μM Stealth™ RNA或者siRNA=20pmol/μl。 培养板 相对表面积(相对24孔) 铺板培养
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