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Cytiva
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文献和实验你是否苦于你纯化的标签蛋白无法达到理想纯度而日夜发愁?是否在换了新的标签后仍不太满意而承受老板们鬼畜般的霹雳大吼?朋友别哭,相信这篇文章可以为你带来纯化高纯度蛋白的新思路。 进行蛋白质功能研究的关键在于得到高纯度蛋白。习惯于构建单标签的你想必遇到过杂质太多,蛋白表达量少甚至不稳定的情况。何不根据目的蛋白性质构建双标签蛋白进行两种不同亲和层析柱的纯化?没准会有意想不到的效果。 01双标签蛋白助力于目的蛋白的高特异性 单组氨酸标签蛋白的亲和层析结果通常不能保证杂蛋白的有效去除
个碳原子的间隔臂共价偶联到 4% 交联的琼脂糖上组成。每毫升树脂可以结合大约 8 mg GST 标签蛋白。树脂浸在 20% 的乙醇中。谷胱甘肽树脂有单独的树脂也有试剂盒形式提供。除了用于洗脱的还原性谷胱甘肽之外,结合/冲洗和洗脱缓冲液也有提供。 产品特点: 用于纯化 GST 蛋白 高载量,8 mg/ml 配基密度,7-15μmoles 谷胱甘肽/ml 树脂尺寸,50-160μm 树脂结构,4% 交联的琼脂糖 10 个碳原子的间隔臂 「名剑」-蛋白亲和纯化
动物和昆虫细胞表达系统,尤其是分泌蛋白的纯化中,His-tag系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基pH通常为酸性,会干扰His-标签蛋白与IMAC纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基,则通常含有氨基酸会竞争His-标签的结合位点,如组氨酸,谷氨酰胺或精氨酸。 Strep-tag®系统对各宿主表达系统的适用情况较为理想。根据其纯化原理,酸性pH和有力的氨基酸不会影响Strep-标签蛋白与纯化树脂的结合(前文也曾提到,此系统的耐受pH范围为4-10)。而哺乳动物细胞培养基中存在的生物素需要注意









