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联硕生物
一般描述
杜氏磷酸盐缓冲盐水(D-PBS)是一种用于处理和培养哺乳动物细胞的平衡盐溶液(BSS)。DPBS缓冲液可用于冲洗、洗涤并稀释哺乳动物细胞,同时维持渗透平衡。它提供正常细胞代谢所必需的水和无机离子。DPBS的钙和镁有助于细胞的结合和成团。不含这些离子的DPBS可用于悬浮后细胞的洗涤和润洗。磷酸缓冲体系将pH维持在生理性范围内。
应用
Dulbecco′s磷酸盐缓冲液已用于:
稀释新鲜红细胞用于研究红细胞聚集物的捕获。[1]
清洗微量滴定板的微孔[2]
在裂解缓冲液中重悬细胞以前清洗细胞进行DNA分离[3]
作为胚胎保存培养基的成分用于胚胎的玻璃化。
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文献和实验在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
玻片中,用P-200移液管去除残留的1X PBS (D8537)。避免通过未剪去尖端的P-200移液管吸入类器官。 用0.5 mL Blocking Buffer(5%马血清+ 0.5% Triton X-100,溶于1X PBS中)在4℃留置一夜或室温下留置2-4小时,渗透固定类器官。注:推荐使用与二抗宿主同物种的血清。 用P-200移液管从含类器官的载玻片上移除Blocking Buffer。避免P-200移液管头吸入类器官。 在Blocking Buffer中制备一抗(300-500 µL
细胞)以及碱性磷酸酶ALP阳性细胞(骨细胞) 利用显微技术进行抗体鉴定检测 吸走培养基. 在室温下用4%甲醛溶液(1.00496)固定细胞. 用PBS (D8537) (200 µl/well)清洗三次,每次5-10 min. 注:可使用密封箔再次封闭板,并在4°C下储存,以备将来使用。 在室温下使用以下材料封闭2小时: 渗透性 封闭缓冲液(用于细胞内抗原): PBS (D8537) 中含有5% 驴血清 (D9663) 和 0.3% Triton X-100 (648463).
Subculture of Adherent Cell Lines
Materials Media� pre-warmed to 37ºC (refer to the ECACC Cell Line Data Sheet for the correct medium) 70% ethanol in water (Prod. No. R8382 ) PBS without Ca2+ /Mg2+ (Prod. No. D8537 ) 0.25% trypsin/EDTA in HBSS, without Ca2+ /Mg
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