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免疫荧光技术
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cusabio
实验步骤:
送样要求:
客户可选择提供4%多聚甲醛固定的组织,组织蜡块,切片,可提供细胞或由本公司代为培养并制作涂片/爬片。客户提供一抗及所需荧光二抗。
价格及周期:
结果包括拍照图片、完整实验报告。
免疫荧光检测,120元/片。切片/爬片制作费用另计。4-7个工作日。
- 切片或爬片制作(固定);
- 脱蜡水化、抗原修复;
- 血清封闭;
- 一抗、二抗孵育;
- 核复染;
- 封片;
- 荧光显微照相;
送样要求:
客户可选择提供4%多聚甲醛固定的组织,组织蜡块,切片,可提供细胞或由本公司代为培养并制作涂片/爬片。客户提供一抗及所需荧光二抗。
价格及周期:
结果包括拍照图片、完整实验报告。
免疫荧光检测,120元/片。切片/爬片制作费用另计。4-7个工作日。
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文献和实验相关实验
固定和透化 在培养板中将已爬好细胞的盖玻片用 1 × PBS 浸洗 3 次,每次 3 min。 用 4% 的多聚甲醛固定爬片 15 min,1 × PBS 浸洗玻片 3次,每次 3 min。 0.5%Triton X-100(1× PBS 配制 )室温通透细胞 15 min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤), 1 × PBS 浸洗玻片 3 次,每次 3 min。 封闭 吸水纸吸干 1 ×PBS,在玻片上滴加 5% 的正常血清(与二抗种属来源一致或相似),室温封闭 1 h
实验流程:多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上,随后即可衔接下一轮单标染色,直至全部标记完成,即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合:1)新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2)梯度乙醇浸片,100% 5min;95% 5min;70% 2min。3)灭菌水洗片1min,重复3次。4)10%中性福尔马林浸片10min,灭菌水洗片1min,重复3次。2.微波修复:1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中,用抗原
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