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Mix-n-Stain 混合即染抗体标记试剂盒
30 分钟内即可完成抗体标记优点:
当今操作步骤最简便的抗体标记方法
在30 分钟内共价标记您的抗体
无需清理剩余染料
容许常见的抗体缓冲液组分的共存
混合即染(Mix-n-Stain)抗体标记试剂盒高效的简化了荧光标记抗体的制备过程。您只需30 秒的手工操作,即将试剂盒内的抗体,CF 染料及反应缓冲液混合。然后经过30 分钟的孵育期,无需其他分离纯化步骤,即可得到您想要的与商业荧光抗体耦联物相媲美的CF 染料抗体的偶联物(图1)。混合即染(Mix-n-Stain)标记试剂盒中,CF 染料被共价联结到抗体上;因此,不存在抗体间染料的迁移或多色印迹时染料的扩散。另外,混合即染(Mix-n-Stain)偶联物在4 摄氏度提供的缓冲溶液中可稳定保持六个月。混合即染(Mix-n-Stain)生物素抗体试剂盒也有售。
根据CF 染料及抗体的范围,混合即染(Mix-n-Stain)标记试剂盒目前有三个包装可供选择,分别是:5-20 ug,20-50 ug,50-100 ug 的抗体。无需计算您应使用染料的数量;您只需将抗体与合适的CF 的染料混合即可。此外,染料标记反应可以容许诸如叠氮化物,三氨基甲烷,盐酸缓冲液,牛血清蛋白,和凝胶等通常抗体缓冲组分的存在。
图1. 用CF ™633 Mix-n-Stain ™( 红色) 结合β- 微管蛋白IgM 的HeLa 细胞示意图,CF ™488A 鬼笔环肽( 绿色) 及DAPI ( 蓝色). 图片用Zeiss 510 共聚焦显微镜拍摄。
图2. 用CF633 混合即染(Mix-n-Stain)试剂盒耦合的CF633 抗微管蛋白抗体(红色)染色海拉(HeLa)细胞。肌丝被CF488 鬼笔环肽染色(绿色),细胞核被4,6- 二氨基-2-苯基吲哚染色(蓝色)。图像是在Zeiss510 Meta 共聚焦显微镜上被采集的。
图3. 用CF633 混合即染(Mix-n-Stain)标记的鼠抗人CD3 抗体染色的Jurkat 细胞的流式细胞分析(BD cat#555330)。作为参考,用商业的Alexa Fluor 647 鼠抗人CD3 染色的细胞(BD cat#557706)。发出的荧光用BD FACSCalibur 流式细胞仪在FL4 通道分析。
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文献和实验,1小时)预处理。预处理后,在每个样品(12.8nM,15min)中加入胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)。细胞裂解,用 WB 测定 p-AKT(Ser473)的相对含量,用 No-Stain 蛋白标记试剂进行总蛋白归一化检测。 参考文献:Yi Liu,. Hydrogen Sulfide Maintains Mesenchymal Stem Cell Function and Bone Homeostasis via Regulation of Ca2+ Channel Sulfhydration
化学显色法,SpotlLight化学发光法的灵敏度要高的多,信号更清晰、干净,而且不会出现一旦显色过度就不可逆转的毛病。5) Clontech Atlas?Glass Fluorescent Labeling Kit: 这是一个间接荧光探针标记试剂盒,标记好的荧光探针适用于各种玻片基质的DNA芯片。在试剂盒提供的dNTP Mix中以氨基化的dUTP(Aminoallyl-dUTP)代替普通的dUTP(这种修饰不影响合成效率),加入2μg以上的样品mRNA或者20μg以上的total RNA,以及基因特异性引物(一般由芯片
MacroArray(包括尼龙膜基质和塑料基质)提供的基因特异引物混合物(CDS Primer)、同位素标记物和逆转录酶,直接在磁珠上合成同位素标记的cDNA探针,最后从磁珠上洗脱标记好的探针,纯化后即可用于杂交。这个标记试剂盒可以从少至10μg的total RNA中制备适用于Clontech公司各种尼龙膜基质和塑料基质MacroArray的高质量cDNA探针。由于将mRNA纯化和cDNA探针合成、标记合为一体,方便用户的同时还可节约成本。这个系统不适用于玻片芯片的探针标记。 4) Clontech公司











