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500ML
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文献和实验即水饱和的溴酚蓝液。在15ml灭菌离心管中,依次加入以下各种成分:4.0ml 10 × FA buffer3.1ml 甲酰胺2.0ml 100%的甘油720ul 37%的甲醛80ul0.5M的 EDTA (PH 8.0)16ul 水饱和的溴酚蓝100ul DEPC水混匀,分装,-20℃保存,常用放4℃保存。5、1×甲醛变性胶电泳缓冲液(1×running buffer):20 ml 10×FA gel buffer,4.0 ml 37%的甲醛,176 ml水,放入电泳槽中使用,一般在3次电泳结束后需
,室温保存。脱色液在 90 ml 甲醇:水(体积比 1:1)和 10 ml 冰乙酸混合液用 0.45/0.22um 的膜抽滤,室温保存。1X Tris - 甘氨酸电泳缓冲液 (即 Running buffer)25 mmol/L Tris250 mmol/L 甘氨酸0.1%(m/V)SDS同样可以扩大配方为 5X 的储存液。30% 丙烯酰胺混合液(100 ml)29.2 g 丙烯酰胺(Acr)0.8 g 亚甲基双丙烯酰胺(Bis)10 g SDS 外包锡纸,4℃ 冰箱保存二、制胶选择胶板(0.75
ZOOM® IPGRunner™系统:简化的双向电泳(2D gel eletrophoresis)
入400μl 用合适的电泳缓冲液制备的0.5%琼脂糖溶液封盖。分子量标准(Mark12™ Unstained Protein Standard, Invitrogen, Cat. no. LC5677)上样到分子量标准孔。胶条使用NuPAGE® Novex 4-12% Bis-Tris ZOOM®胶(Invitrogen, Cat. no. NP0330),按照标准程序在XCell SureLock® Mini-Cell 槽(Invitrogen, Cat. no. EI001)中进行电泳。200
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