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文献和实验体、紫菜配子体、江蓠、龙须菜可行。 五、甲藻 1、取对数生长期的培养物,在 4 ℃下用 冷冻离心机6000 rpm离心 6 min,收集藻细胞。 2、收集的藻细胞放于液氮中冷冻半个小时后,在研钵中研磨成粉末,转移到 1.5mL 的灭菌离心管中,加入总体积 700μL 裂解缓冲液(100mM EDTA, pH 8.0;10 mM Tris-HCl, pH 8.0;1% SDS;200 μg/mL Protease K)放于55 ℃温浴 3 h,其间不时摇动。 3、待溶液澄清透亮裂解
3.2.3 PCR program同3.1.3;使用PCR thermal cycler 4.0 胶片电泳分析 4.1 胶片 (2.0%) 置备: 将2 g agarose溶于100 ml ( 1x ) TAE buffer。 4.2 电泳液:(1x) TAE buffer(Tris-acetate/EDTA electropheresis buffer) 4.3 选择100~500 bp DNA size Marker:取100 bp ladder Marker 5 ul ( 25 ng
RNA的完整性可以通过琼脂糖变性电泳分析检测,而含量则通过紫外分光光度计确定。常见的变性电泳有甲醛变性电泳,戊二醛变性电泳等。甲醛变性电泳检测RNA完整性一、材料、试剂和仪器1 材料: 植物总RNA 5-10μg2 试剂:1)加样运载缓冲液(Loading buffer),50% 甘油,1mmol/L EDTA (pH 8.0),0.25%溴酚蓝,25%二甲苯氰FF2)10×TAE Buffer3)5×甲醛凝胶电泳缓冲液:,0.1mol/L MOPs (pH7.0),40mmol/L乙酸
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