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- sigma
- 进口
- L4005-100mg
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 库存：
现货
- 供应商：
联硕生物
- 规格：
1瓶
一般描述
该产品是从大肠杆菌血清型O55：B5中通过TCA提取获得。源菌株为CDC 1644-70。LPS O55：B5已用于以1ng/ml的浓度刺激人腹膜巨噬细胞，以及以1-100ng/ml的浓度刺激马腹膜巨噬细胞。
应用
脂多糖（LPS）是革兰氏阴性细菌细胞壁的特征组分。脂多糖及其脂质 A 部分通过 Toll 样受体 4（TLR4）刺激先天免疫系统的细胞，Toll 样受体 4是 Toll 样受体蛋白家族的成员，其识别常见的病原体相关分子模式（PAMP）。
生化/生理作用
脂多糖（LPS）位于膜的外层，并且在非包封的菌株中暴露在细胞表面上。它们有助于外膜的完整性，并保护细胞免受胆汁盐和亲脂性抗生素的作用。
制备说明
该产品可溶于水（5mg/mL）或细胞培养基（1mg/mL），并产生浑浊的淡黄色溶液。在涡旋并升温至70-80 oC后，在盐水中可获得更加浓缩但仍然浑浊的溶液（20mg/ml）。脂多糖是一种能在各种溶剂中形成胶束的分子。在水和磷酸盐缓冲盐水中可观察到浑浊的溶液。通过有机溶剂无法获得更澄清的溶液。在甲醇会产生含有漂浮物的混浊悬浮液，而在水中则产生均匀的浑浊溶液。
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文献和实验5mlLB培养基中，于37℃培养3－5小时 3.将培养液全部转到100mlLB培养基中培养2－3小时，到OD600＝0.3－0.4感受态细胞制备: 4.将培养液转入1.5ml离心管中，在冰上放置15－30min 5.4000rpm离心5min,弃上清 6.加入0.8ml预冷的0.1mol/l CaCl2,悬浮沉淀，冰上预冷10min 7.4000rpm离心5 min,弃上清 8.加入0.2ml预冷的0.1mol/l CaCl2,悬浮沉淀，即可使用。也可加入总体积15％的甘油 可－70℃长期
后的目标蛋白产量范围在1.5-100mg/L。趋化因子和细胞因子可以得到高达30-100mg/L的产量。其它关于这些蛋白表达和纯化的有参考价值信息包括： ■ 植物磷酸烯醇式丙酮酸—羧化酶激酶（Ermolova 2003）——目标蛋白切除标签后用BDA（蓝色葡聚糖）亲和层析树脂纯化。纯化后蛋白的催化活性比未切除标签的融合蛋白高50倍。 ■ Xklp3a，Tep3Ag和E8R（De Marco 2004）——用蛋白酶切割后，His-融合的TEV和NusA被Ni2+离子亲和色谱选择性去除
震荡培养箱37℃；冰浴；微量离心机；分光光度计 （Hitachi U-1100 spectrophotometer）药品试剂：大肠杆菌菌株pQG11/M15[pREP4];LB 培养液；Ampicillin （100 mg/mL）；Kanamycin （25 mg/mL）；IPTG （1 M）；Protoplasting buffer （15 mM Tris-HCl, pH 8.0; 0.45 M sucrose; 8 mM EDTA, stored at 4℃）；Lysozyme （50 mg/mL
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