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常温
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现货
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联硕生物
- CAS号:
12650-88-3
- 规格:
1瓶
一般描述
纯化无DNA溶菌酶K SAE0152已经过严格的质量控制测试,以确保通过35个循环对16S和18S rDNA(使用通用引物对)进行PCR扩增时,不存在可检测水平的污染DNA。
溶菌酶是一种由129个氨基酸与四个二硫键交联的单链多肽。1 它可水解(1à 4)肽聚糖中N-乙酰胞壁酸与N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间以及壳糊精中N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间的(1à 4)连接。2,3,4 该酶常用于通过水解存在于细胞壁中的肽聚糖来裂解细菌细胞。革兰氏阳性细胞对这种水解非常敏感,因为它们的细胞壁中的肽聚糖比例很高。革兰氏阴性菌就对这种水解没那么敏感,因为它们有外膜并且肽聚糖的比例较低。
该酶在广泛的pH范围(6.0至9.0)内具有活性。
溶酶菌活性:≥40,000个单位/mg蛋白。
对于核酸的分离,溶菌酶已被用于裂解细菌细胞壁的肽聚糖层。
近年来,通过广泛采用与培养无关的分析技术(例如16S rRNA基因测序和宏基因组学),微生物群落的研究发生了彻底变化。由于样品制备过程中的DNA污染是这些基于序列的方法的主要问题,因此不含DNA污染的DNA提取试剂至关重要。这种纯化溶菌酶制剂(SAE0152)可从鸡蛋清中提纯,经过三次结晶,透析,然后作为冻干粉供应。通过紫外吸度度测定的蛋白质含量为≥90%,其余(10%)为乙酸钠和氯化钠等缓冲盐,经过严格的质量控制测试,以确保通过35个循环对16S和18S rDNA(使用通用引物对)进行PCR扩增时,不存在可检测水平的污染DNA。
应用
溶菌酶可用于从细菌细胞中提取基因组DNA。
溶菌酶可作为外部标准品用于MALDI-TOF(基质辅助激光解吸电离-飞行时间)质谱分析。
溶菌酶可用于制备原生质球。
酶可分解细菌的细胞壁;用于制备原生质体。
生化/生理作用
溶菌酶可水解肽聚糖中N-乙酰胞壁酸与N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间以及壳糊精中N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间的β(1→4)连接。 革兰氏阳性细胞对这种水解非常敏感,因为它们的细胞壁中的肽聚糖比例很高。革兰氏阴性菌就对这种水解没那么敏感,因为它们有外膜并且肽聚糖的比例较低。然而,这些细胞可能在细胞外膜中螯合金属离子的EDTA存在的情况下水解。
该酶在广泛的pH范围(6.0至9.0)内具有活性。pH值为6.2时,可在更广的离子强度范围(0.02至0.100 M)观察到最大活性,而pH值为9.2时为0.01至0.06 M。
溶菌酶可水解肽聚糖中N-乙酰胞壁酸与N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间以及壳糊精中N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间的β(1→4)连接。革兰氏阳性细胞对这种水解非常敏感,因为它们的细胞壁中的肽聚糖比例很高。
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