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常温
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现货
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联硕生物
- CAS号:
12650-88-3
- 规格:
1瓶
一般描述
纯化无DNA溶菌酶K SAE0152已经过严格的质量控制测试,以确保通过35个循环对16S和18S rDNA(使用通用引物对)进行PCR扩增时,不存在可检测水平的污染DNA。
溶菌酶是一种由129个氨基酸与四个二硫键交联的单链多肽。1 它可水解(1à 4)肽聚糖中N-乙酰胞壁酸与N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间以及壳糊精中N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间的(1à 4)连接。2,3,4 该酶常用于通过水解存在于细胞壁中的肽聚糖来裂解细菌细胞。革兰氏阳性细胞对这种水解非常敏感,因为它们的细胞壁中的肽聚糖比例很高。革兰氏阴性菌就对这种水解没那么敏感,因为它们有外膜并且肽聚糖的比例较低。
该酶在广泛的pH范围(6.0至9.0)内具有活性。
溶酶菌活性:≥40,000个单位/mg蛋白。
对于核酸的分离,溶菌酶已被用于裂解细菌细胞壁的肽聚糖层。
近年来,通过广泛采用与培养无关的分析技术(例如16S rRNA基因测序和宏基因组学),微生物群落的研究发生了彻底变化。由于样品制备过程中的DNA污染是这些基于序列的方法的主要问题,因此不含DNA污染的DNA提取试剂至关重要。这种纯化溶菌酶制剂(SAE0152)可从鸡蛋清中提纯,经过三次结晶,透析,然后作为冻干粉供应。通过紫外吸度度测定的蛋白质含量为≥90%,其余(10%)为乙酸钠和氯化钠等缓冲盐,经过严格的质量控制测试,以确保通过35个循环对16S和18S rDNA(使用通用引物对)进行PCR扩增时,不存在可检测水平的污染DNA。
应用
溶菌酶可用于从细菌细胞中提取基因组DNA。
溶菌酶可作为外部标准品用于MALDI-TOF(基质辅助激光解吸电离-飞行时间)质谱分析。
溶菌酶可用于制备原生质球。
酶可分解细菌的细胞壁;用于制备原生质体。
生化/生理作用
溶菌酶可水解肽聚糖中N-乙酰胞壁酸与N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间以及壳糊精中N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间的β(1→4)连接。 革兰氏阳性细胞对这种水解非常敏感,因为它们的细胞壁中的肽聚糖比例很高。革兰氏阴性菌就对这种水解没那么敏感,因为它们有外膜并且肽聚糖的比例较低。然而,这些细胞可能在细胞外膜中螯合金属离子的EDTA存在的情况下水解。
该酶在广泛的pH范围(6.0至9.0)内具有活性。pH值为6.2时,可在更广的离子强度范围(0.02至0.100 M)观察到最大活性,而pH值为9.2时为0.01至0.06 M。
溶菌酶可水解肽聚糖中N-乙酰胞壁酸与N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间以及壳糊精中N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间的β(1→4)连接。革兰氏阳性细胞对这种水解非常敏感,因为它们的细胞壁中的肽聚糖比例很高。
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文献和实验溶菌酶 溶菌酶(1ysozyme)因具有溶菌活性而得名。根据作用对象,分为细菌胞壁溶菌酶和真菌胞壁溶菌酶;根据来源,分为人、动物、植物和微生物溶菌酶。人溶菌酶检出于泪液、唾液、乳汁等,由M中组成性地产生。动物中的溶菌酶以鸡蛋清中含量最高,是溶菌酶的代表。鸡蛋清溶菌酶属于一种稳定的碱性蛋白,由129个氨基酸残基组成,分子质量为14kDa。 溶菌酶可直接作用于革兰阳性菌胞壁裸露的肽聚糖。肽聚糖由三种成分共同构成立体网状结构,即N-乙酰
。另外随着基因工程技术的发展,通过人工合成基因,用微生物发酵生产人溶菌酶的研究也正在深入进行之中。 鸡蛋清溶菌酶是由129个氨基酸残基组成的碱性球蛋白,单一肽链,分子量为14388,分子内含有4对二硫键。由于其含的碱性氨基酸残基比酸性氨基酸残基多,所以它的等电点高达11左右,等电点约为10.5~11,最适温度为50℃,最适pH为6~7左右。鸡蛋清中的溶菌酶的含量约占蛋白质总量的3.4%~3.5%。 溶菌酶既是药品又是保健品,还是生化药物中理想的药物酶,国外已经开始利用于药物
相关专题 一、实验目的 1.熟悉溶菌酶的功能、分布以及作用特性。 2.掌握溶菌酶的提取及活力测定方法。 二、实验原理 溶菌酶又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶,是一种碱性糖苷水解酶,能作用于细菌 细胞壁的粘多糖,具有杀菌等作用,广泛应用于医学临床。 溶菌酶存在于植物 浆及动物(蛋清、血浆、淋巴液和鼻粘膜等处)组织中,其中鸡蛋清中含量较为丰富,且鸡蛋清取材方便,因此实验室及实际生产中一般以鸡蛋清为原料进行溶菌酶
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