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Gibco™ 细胞解离缓冲液是一种膜过滤的等渗无酶盐溶液螯合剂,以及在无钙和无镁的磷酸盐缓冲液 (PBS) 中作为细胞调节剂。Gibco™ 细胞解离缓冲液适用于对哺乳动物细胞进行温和的解离,以进行需要完整细胞表面蛋白的研究,如配体结合、流式细胞术和免疫组织化学。Gibco™ 细胞解离缓冲液适用于轻微贴壁细胞系(例如 HeLa 和 NIH 3T3),但不建议用于强贴壁细胞的常规传代。
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文献和实验【交流】大家来看看我的ISH protocol!哪里有问题么?
0.2%甘氨酸PBS * 2 5min RT(暂时省略该步骤) 4 PBS *2 5min RT 5预杂交液 300 ul 10min RT(ISH buffer 我是按照预杂交液和杂交液共同组方配置的,预杂交液加入无酶水,杂交液加入葡聚糖和探针) 160ul ISH buffer 40ul 无RNA酶水 6探针杂交液杂交(临用前配置。65度预热30min线性化探针) 150 ul 3hour 50度 120ul ISH buffer 30
管 rCPB 反复冻融 10 次后的活力稳定性。 结果表明重组羧肽酶B 反复冻融稳定性好。经过 10 次的反复冻融,几无活性损失。 6.抗体碱性峰检测 羧肽酶B 的准备:用 1X PBS pH7.5, 溶解羧肽酶B 至 1 g/L,分装后-20℃ 保存。 抗体:纯化后的单抗样品超滤至磷酸缓冲液(pH=7.5)中(1~2 g/L)。 酶用量:按样品:酶= 20:1-100:1,此处用量为 100:1。 孵育温度及时间:37℃ 反应 30 分钟。检测
每次冻融后的酶活,计算活力保留率,得到同一管 rCPB 反复冻融 10 次后的活力稳定性。 结果表明重组羧肽酶 B 反复冻融稳定性好。经过 10 次的反复冻融,几无活性损失。 抗体碱性峰检测 羧肽酶 B 的准备:用 1X PBS pH7.5, 溶解羧肽酶 B 至 1 g/L,分装后-20℃ 保存。 抗体:纯化后的单抗样品超滤至磷酸缓冲液(pH=7.5)中(1~2 g/L)。 酶用量:按样品:酶= 20:1-100:1,此处用量为 100
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