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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Cellulase(endo-1,4-D-Glucanase)(T.longibrachiatum)
- 保质期:
1年以上
- 供应商:
爱尔兰Megazyme公司
- 库存:
大量
- 保存条件:
4-6摄氏度
- 规格:
100孔
1.快速酶切:5-15 min完成酶切,较常规酶切实验可减少1-2 h以上。
2.通用缓冲液:任意内切酶组合都能用同一缓冲液,多酶切反应更简便。
3.酶切效果:媲美进口品牌N*,且兼容其缓冲液。
4.直接电泳:提供红色Color缓冲液,酶切产物可直接点胶电泳,操作更简便。
5.精准酶切:即使过夜酶切,星号活性也极低。
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文献和实验probe amplification,MS-MLPA) Anders O.H.等2005年改进MLPA[44]为MS-MLPA[45]用于检测特异位点的甲基化。MS-MLPA中,针对甲基化的和非甲基化的位点分别设计两个探针,每个探针都包括两个寡核苷酸部分,其中短的部分由合成产生,长的部分来源于phageM13的衍生物,后者有一个非杂交填充片段,不同探针其长度不同。探针的两个寡核苷酸杂交序列均与目标序列互补,其末端都连有相同的PCR引物。且要求[45]设计的MS-MLPA的探针要有甲基化敏感的限制性内切酶
,采用随酶提供的NEBuffer,在推荐的温度下温育4小时。通过可溶解的TCA着色,可以计算出反应体系中被标记的DAN的百分比,进而可以显示出核酸外切酶的污染。该种方法可检测出的底线是0.05%。 DNA片段的连接 DNA片段通过用每一种限制性内切酶 过量消化底物DNA而获得。这些片段随后用T4 DNA连接酶连接( 5′ 末端浓度为0.1-1.0 μM)。连接的片段然后用同一种限制性内切酶重切。仅当3′ 和 5′末端都保留完整,连接
/min , 28 ℃ 恒温振荡培养。(2) 发酵液制备 在培养期间,每天取样,4000r /min 离心15min ,上清液即为发酵液。3. 木聚糖酶活力测定(1)底物1%和DNS试剂制备 木糖标准曲线制作均参照文献 。 (2)活力测定 取底物1ml于管中,据酶活大小加适量的粗酶液,补加柠檬酸钠缓冲液至2ml,50℃水浴反应30 min ,加3 ml DNS混匀,沸水浴7min ,取出冷却后加水至25 ml ,在540nm处测OD值。以每分钟1ml 粗酶液与木聚糖反应产生木糖的浓度作为1个酶活










