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- 2026年02月08日
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- 保质期：
2年
- 英文名：
jianlun
- 库存：
0
- 供应商：
健仑
- 保存条件：
2-8度
- 规格：
96T/盒
产品咨询联系电话：020-82569399
【试剂盒简介】
猪伪狂犬病毒PCR 检测试剂盒，采用聚合酶链反应（PCR ）技术检测猪血清和组织中的PRV，适用于PRV的检测、诊断和流行病学调查。
【原理】
提取DNA作为模板，在DNA 聚合酶的作用下，经高温变性、低温退火和中温延伸的多次循环，使特异DNA 片段的拷贝数放大数百万倍。将扩增的DNA 片段进行电泳、染色后，在紫外灯下，肉眼可见DNA 片段的扩增带。
【试剂盒组份】
| 1. 裂解液 | 8mL | 8. 阳性对照 | |
| 2. 蛋白酶K | 110μL | 9. 0.2 mL 薄壁PCR 管 | 15个 |
| 3. 抽提液 | 8mL | 10. PCR 反应液A | 180μL |
| 4. 异丙醇 | 7mL | 11. PCR 反应液B | 50μL |
| 5. 洗涤液 | 12mL | 12. 50 倍TAE 电泳缓冲液 | 20mL |
| 6. 无菌水 | 500μL | 13. 染色液 | |
| 7. 阴性对照 | 300μL | 10μL |
【操作方法】
一、样品制备
1样品采集：病死或扑杀的猪，取大脑海马背侧皮层、中脑、脑桥、扁桃体、淋巴结等组织；待检活猪，用棉拭子取鼻腔分泌物，置于50%甘油生理盐水中，或用注射器取血5 mL，2～8 ℃保存。（要求送检病料新鲜，严禁反复冻融。）
2样品处理：
2.1 组织样品的处理：称取组织0.1g于研磨器中磨碎，再加1mL生理盐水继续磨至无块状物；然后将样品转至1.5 mL灭菌离心管中，8000 rpm离心5 min，取上清100 µL于1.5 mL 灭菌离心管中，加入500 µL裂解液和10 µL蛋白酶K，混匀后37℃温育1h。
2.2 全血样品的处理：待血凝后取血清放于离心管中，8000 rpm离心5 min，取上清100 µL于1.5 mL 灭菌离心管中，加入500 µL裂解液和10 µL蛋白酶K，混匀后37℃温育1h。
2.3 阳性对照的处理： 混匀后取100 µL于1.5 mL 灭菌离心管中，加入500 µL裂解液和10 µL蛋白酶K，混匀后37℃温育1h。
2.4 阴性对照的处理： 混匀后取100 µL于1.5 mL 灭菌离心管中，加入500 µL裂解液和10 µL蛋白酶K，混匀后37℃温育1h。
二、病毒DNA的提取
1. 取出已处理的样品、阴性对照和阳性对照，分别加入600µL抽提液（用抽提液之前不要晃动，不要吸到上层保护液），用力颠倒10次混匀，12,000 rpm 离心10min。
2. 取500µL上清置于灭菌离心管中，加入500µL异丙醇，混匀，置液氮中3min或-70℃冰箱中30min。取出样品管，室温融化，13,000 rpm 离心15min。
3. 弃上清，沿管壁缓缓加入1mL 洗涤液，轻轻旋转一周后倒掉，将离心管倒扣于吸水纸上1min，再将离心管真空抽干15min或37℃烘干。
4. 用30µL无菌水溶解沉淀，作为模板备用。
三、PCR
1. 反应体系：分别取16µL PCR反应液A（用前混匀）、2µL PCR反应液B（用前混匀）和2µL模板DNA，混匀。
2. 反应程序：在PCR仪上运行以下程序： 94 ℃ 3 min ；94 ℃ 30 s 、55℃ 30 s 、72 ℃ 30 s，35个循环；72 ℃延伸10 min。
四、电泳
1. 制胶：用50倍稀释的TAE电泳缓冲液配制1%琼脂糖凝胶。
2. 电泳：待胶凝固后，取5µL PCR扩增产物点样于琼脂糖凝胶孔中，以5V/cm的电压于50 倍稀释的TAE 电泳缓冲液中电泳。
3. 染色：取50 倍稀释的TAE 电泳缓冲液30mL，加入10µL染色液，混匀后将胶浸泡30min，于紫外灯下观察结果。
【结果判断】
阳性对照出现400bp扩增带，阴性对照无带出现（引物带除外）时，实验结果成立。被检样品出现400bp扩增带为猪伪狂犬病毒阳性，否则为阴性。
【需用但未提供的材料】
组织研磨器、眼科剪、眼科镊、一次性注射器、琼脂糖、灭菌1.5mL 离心管和吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）。
【注意事项】
1．本试剂盒有效期为6个月，不要使用超过有效期限的试剂，试剂盒之间的组分不要混用。
2．所有试剂应在规定的温度储存，使用时拿到室温下，使用后立即放回。
3．注意防止试剂盒组分受污染。使用前将塑料袋内试剂瞬离15s，使液体全部沉于管底，放于冰盒中，吸取液体时移液器吸头尽量在液体表面层吸取。
4．严格按试剂盒说明书操作可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时等全部过程必须精确。
5．所有接触病料的物品均应合理处理，以免污染实验室。
【公司名称】 广州健仑生物科技有限公司
【联系电话】 020-82569399
【公司传真】 020-32206070
【电子邮件】 Hong@jianlun.com
【腾讯 QQ 】 712628584
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文献和实验性传播性疾病（sexually transmitted diseases,STD）的检测
抗 原 类 试 验 ， 需要 一 定 的 设 备 条 件 ， 操 作较 为 复 杂 ， 试 剂 精 确 度 要 求 较 高 。 它 既 有 较 高 的 敏 感 性 ， 又 有 很高 的 特 异 性 ， 常 被 作 为 梅 毒 诊 断 的 证 实 试 验 。 但 是 由 于 95％以 上的 病 人 ， 一 旦 试 验 呈 阳 性 反 应 后 ， 即 使 经 过 治 疗 ， 也 终 身 不 会 转 为阴 性 。 因 此 不 能 作 为 疗 效 观 察 和 随 访 的 指 征 。
体数目、染色体差异以及染色体响变的自发频率选择合适的细胞。北京汇智泰康医药技术有限公司针对染色体畸变试验开发染色体畸变试验试剂盒， 本试剂盒省去了阳性底物成分准备、诱导 S9 制备，可以直接使用，大大缩短了实验周期；试剂盒各成分均经过严格的质量检测，无杂菌污染，诱导 S9 活性均符合染色体畸变试验要求，实验结果准确、可靠、重现性高。染色体畸变试验试剂盒应用广泛，可进行食品、化学品、农药、消毒剂、食品添加剂、药物残留、化妆品、容器与包装材料等多个方面的遗传毒理学检测。染色体畸变试验导则1 规范性引用文件
水浸泡或用氯仿冲洗（注意：有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀，故不能使用）。 3. 有机玻璃的电泳槽等，可先用去污剂洗涤，双蒸水冲洗，乙醇干燥，再浸泡在3% H2O2 室温10 min，然后用0.1% DEPC水冲洗，晾干。 4. 配制的溶液应尽可能的用0.1% DEPC，在37 ℃处理12 h以上。然后用高压灭菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂，应当用DEPC处理过的无菌双蒸水配制，然后经0.22 μm滤膜过滤除菌。 5. 操作人员戴一次性口罩. 帽子. 手套，实验过程中手套
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