抗原修复盒 YA0750 免疫组化

免疫组化染色方法及常用抗原修复方法

一、SP 法 1）脱蜡、水化；2）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；3）3% H2O2（80% 甲醇）滴加在 TMA 上，室温静置 10 分钟；4）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；5）抗原修复；6）PBS 洗 2～3 次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗 50μl，室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9）4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10）PBS 洗 3 次各 5 分钟；11）滴加 Ⅱ 抗 40～50 μl，室温

石蜡切片免疫组化实验步骤

脱蜡和水化 将切片依次浸入二甲苯Ⅰ10 min，二甲苯Ⅱ（10 min）。 再次浸入无水乙醇Ⅰ（5 min）-无水乙醇Ⅱ（5 min）-95%酒精（5 min）-80%酒精（5 min）-70%酒精（5 min），然后去离子水冲洗2次，每次2 min。 抗原修复 (可选) 将组织切片放入修复盒，然后加入适量 0.01M 枸橼酸缓冲液（pH 6.0）或 EDTA 修复液（pH 9.0），液面要浸没组织。 微波中档修复 10 min（液体沸腾时开始计时），此过程中勿使组织干片

免疫组化常见十大问题与解析

不完全，若存在，需延长脱蜡时间或换用新的二甲苯。 （5）抗原修复不完全：对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合。 （6）细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应：可加入组织透化步骤，进行细胞膜或核膜的透化。 （7）试剂盒保存不当：请于 4℃ 进行保存，勿室温防止过长时间。 （8）封闭时间过长：若使用封闭液进行封闭，请排除封闭液对抗原抗体结合的影响。 Q2：免疫组化染色弱怎么办？ （1）抗体浓度过低，孵育时间过短：可提高抗体浓度，进行抗体4℃过夜孵育。 （2）组织