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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Si from (NH4)2SiF6 10,000 µg/mL in H2O
- 库存:
1
- 供应商:
甄准生物
- 规格:
250ML
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文献和实验Phycoerythrin conjugation protocol
P-801, R-PE in 60% NH4 SO4 at 4 mg/ml. 0.25 ml of P-801. Spin 10 mins on low in microfuge. Discard supernatant. Resuspend PE in 0.25 ml PBS. Dialyze twice for 30 mins versus 150 ml PBS at room temperature. Adjust PE to approx 1.4 mg
of H2O followed by three times each with 30 µL of 100 mM acetic acid. Affinity Binding of Phosphopeptides to IMAC Column Digest the phosphoprotein (~0.1 µg/µL) with trypsin (protein:enzyme ratio of 20:1 to 100:1 [w/w]) in 50 mM NH4HCO3 buffer (pH
=8.0)和 300 uL 氯仿,颠倒混匀,静置 5 min,14 000×g 离心 10 min。(3)取上清至新 Ep 管中,加入 270 ul 苯酚和 270 ul 氯仿混匀,静置 5 min,14 000×g 离心 10 min。(4)取上清至 EP 管中,加入 270 ul 苯酚和 350 ul 氯仿,轻混,静置 5 min,14 000×g 离心 10 min。(5)取上清至新的 EP 管,加入 500 ul 苯酚,静置 5 min,14 000×g 离心 10 min。(6)去上清液(约 400
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