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- 文献和实验
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- 保存条件:
4℃,避光,6个月
- 库存:
100
- 供应商:
上海远慕生物
- 规格:
500ml
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文献和实验ml,置棕色瓶,4℃贮存。 ② 分离胶贮液:28%Arc-0.735%Bis储液:丙烯酰胺(Acr)28.0g,甲叉双丙烯酰胺(Bis)0.735g,加重蒸水使其溶解后定容至100ml。过滤后置棕色试剂瓶中,4℃ 贮存,一般可放置1个月左右。 ③ 分析纯过硫酸胺(AP)(AR) 0.14g加重蒸水至100ml,置棕色瓶,4℃储存仅能用一周,最好当天配制。上述3种试剂用于制备分离胶。 ④ 浓缩胶缓冲液:称取1mol/L HCl 48ml,Tris5.98g
%Acr18.8ml,1%Bis4.7ml,pH8.7Tris-HCI缓冲液11.3ml,H2O9.8ml。混匀后压抽气5min 。取出后向烧杯中再加10%SDS0.5ml,10%过硫酸按0.2ml,TEMED50ul,轻轻摇匀后灌入玻璃板胶腔中至适当高度,加25%乙醇约0.5cm封闭表面。 (3)待分离胶聚合后,倒掉乙醇溶液,再灌浓缩胶。操作方法:另取50ml烧杯1只,加30%Acr 3.0ml,1%Bis 3.0ml,pH6.5 Tris-HCI缓冲液7.5ml ,H2O16.5ml。混匀后减压
时的电流最好不超过5mA/管,以免产生过多热量。室温高时应进行冷却或冷库内进行电泳。 4、本实验需时间较长。在一次实验中可安排到脱色一步,再于下一次实验中观察脱色后的胶条并绘图。 5、在碱性条件下,凝胶易聚合,其聚合速度与Ap浓度平方根成正比,一般在室温下,pH8.8时,7.5%丙烯酰胺溶液30min完成聚合作用,在pH4.3时聚合速度很低,约需90min才能聚合,此外应选择高纯度的Acr和Bis。杂质。某些金属离子、低温和氧分子能延长或阻止碳链的延长与聚合作用。
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