- 询价
- GE
- USA
- 17-0891-01
- 2026年01月06日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
1年以上
- 英文名：
Percoll
- 库存：
现货
- 供应商：
科昊佳生物
- CAS号：
17-0891-01
- 保存条件：
RT
- 规格：
1L/100 ml
| 规格： | 1L | 产品价格： | 询价 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100 ml | 产品价格： | 询价 |
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞
Percoll是一种包有乙烯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(<20mosm／kg H２O), 粘度也很小，可形成高达1.3g／ml密度，采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200～1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低，所形成的梯度十分稳定。此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
(二)操作方法及注意事项
1.不同浓度(密度)Percoll溶液的制备: 先用9份Percoll与1份8.5％ NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压，然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。
Percoll浓度(％) 70 60 50 40 30 20
比重g／ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031
2.不连续密度梯度Percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润，除去多余血清，这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下，使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置，有时相邻两层Percoll比重相差不大时，可将Percoll液放入注射器中，小针头斜面紧贴管壁，任其自然慢慢流下。
3.装样：样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异，一般加样体积不宜过大，细胞浓度也不可过高，否则会影响细胞的分离和回收。
4.离心：一般采用离心力为400g，时间20～25min。由于多层Percoll之间密度差别不大，因此离心机加速、降速时要慢，要平稳。
5.取样：当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时，可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。
(三)分离纯化细胞举例
1.富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化:按顺序由下向上逐层加50％、47.5％、45％、42.5％和40％五种不同密度的Percoll,如用10ml试管(或塑料管)分离,每层Percoll约1.2～1.5ml，初步从外周血中分离的PBMC细胞1×10８悬于１ml培基中，按要求装样、离心和取样。一般富含NK杀伤活性的LGL细胞位于42.5％与45％Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。
2.纯化淋巴母细胞和除去死细胞：分别叠加50％和30％Percoll液。收取经PHA(或其它抗原、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异型的PBMC(如肾综合征出血热患者)，按要求装样、离心和取样。位于管底的淋巴细胞为小淋巴细胞；两层Percoll之间为淋巴母细胞，纯度和回收率在80％以上，位于30％Percoll表面是死细胞。收获淋巴母细胞可进行表型、结构以及功能的研究。
(四) 人不同血细胞的漂浮密度
表 人不同血细胞的漂浮密度
──────────────┬──────────────────
细 胞 漂浮密度 │ 细 胞 漂浮密度
──────────────┼──────────────────
红细胞 1.09-1.11 │淋巴细胞 1.052-1.077
粒细胞 │ B淋巴细胞 1.062-1.075
嗜酸性 1.09-1.095 │ T淋巴细胞 1.065-1.077
嗜中性 1.080-1.085 │ 淋巴母细胞 1.065-1.077
单核细胞 1.050-1.066 │自然杀伤细胞 1.050-1.070
血小板 1.030-1.060 │
──────────────┴──────────────────
(五)问与答
问：请问percoll连续梯度怎么配制？比如15%---75%的percoll连续梯度?
答：根据你需要的具体密度梯度决定的，根据要分离的不同细胞种类，数量等等，也有用原液配的。也有用80％配的，不一定的。另外，percoll本身是低渗透压的，要用高渗透压溶液配成生理等渗透压溶液，然后使用，不然，细胞容易破裂。一般是先用9份Percoll与1份8.5％ NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压，然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。即取Percoll原液与10倍浓缩的PBS以9：1的比例混合，此时溶液 为100％ Percoll，比重是1.127，毫克分子渗透压浓度为290mOsmol/kg
Percoll浓度(％) 70 60 50 40 30 20
比重g／ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031
产品包装：
| Product | Pack sizee | 产地 | Product Code |
| Percoll | 1 L | GE | 17-0891-01 |
| Percoll | 100 ml | GE | 17-0891-01 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验GE推出首个符合GMP制备单核细胞培养基Ficoll-Paque™ PREMIUM
相关专题 细胞培养基的配制 GE医疗集团于10月17号推出Ficoll-Paque™ PREMIUM产品。Ficoll-Paque是已经有30年历史的，用于从血液和骨髓中制备人类单核细胞 的产品。Ficoll-Paque PREMIUM比起它之前的Ficoll-Paque PLUS除了证明有同样可信的结果外，还采用了ISO质量系统和消毒生产标准。 之前的Ficoll-Paque PLUS作为一种消毒后的培养基在利用骨髓
Healthcare Life Sciences #17 - 1440 - 02) RPMI 1640 培养基（Invitrogen） 胎牛血清（FBS）（GIBCO） 双抗 P/S（Penicillin/ Streptomycin) (GIBCO) 二甲亚砜（DMSO）（SIGMA） 预先装好异丙醇的冻存盒 2. 方法/步骤 配制所需的溶液： a. 细胞培养基：RPMI 1640 + 10% FBS+ 1% P/S； b. 细胞冻存液：FBS 中加入 10%DMSO； （1）在离心管中加入淋巴细胞分离
陈建忠 (诸暨市红十字医院,浙江诸暨311800) [摘要]综合介绍DNA 测序中常用毛细管凝胶电泳(C GE) 分离技术。着重分析了C GE 生物大分子(例如DNA) 分离原理、 优点以及影响分离结果的主要因素。从理论上对影响分离的因素作出调控优化的论述。 [关键词]DNA 测序;C GE 分离技术;分辩率 [中图分类号]R319 [文献标识码]A [文章编号]1007 - 7510(2005) 01 - 0042 - 02
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
