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Oligotex Suspension (0.5)
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文献和实验0. (Optional) Before using Oligotex-dT30, I recommend to wash Oligotex-dT30 to remove fine particle of latex. To wash the latex, transfer appropriate amount of Oligotex-dT30 (300 ul of the suspension of Oligotex per 1mg
Purification of poly(A)+ RNA from total RNA
30 (300 ul of the suspension of Oligotex per 1mg of total RNA) into a microfuge tube. Spin for 3 min at 12,000 rpm. Discard the supernatant. Gently suspend the latex in the same volume of 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM EDTA, 0.1% SDS. Spin
0.25 mg)到一个新的无RNase 的EP管中,用无RNase的水定容到250 μl。2、加入Buffer OBB 250 μl, Oligotex Suspension 15 μl。用Tip打匀或用手弹匀。3、70℃水浴,3 min(裂解RNA的二级结构)。4、20-30℃条件下,静置10 min(让Oligotex与mRNA结合)。5、高速离心2 min,小心吸走上清(该上清要保留),留下约50 μl的上清在原管里。6、用Buffer OW2 400 μl重悬含Oligotex/mRNA复合
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