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- 2025年07月05日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
AZCL-Pachyman
- 库存：
1
- 供应商：
甄准生物
- 规格：
3 g
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文献和实验时，其灵敏度和定量与荧光基质底物4-MU（四甲基伞形酮）相关。 2 应用原理 4-MU酯类只有裂解之后才能产生荧光。进行荧光素酶检测主要基于以下原理：首先要水解含有4-MU的底物，比如β-葡萄糖醛酸酶水解β-4-MU-葡萄糖醛酸或β-Gal水解β-4-MU-半乳糖。β-Gal水解4-MU-β-D-半乳糖产生的荧光分子4-MU，在365nm激发时能在460nm处产生发射光。 Turner BioSystems
probe amplification，MS-MLPA) Anders O.H.等2005年改进MLPA[44]为MS-MLPA[45]用于检测特异位点的甲基化。MS-MLPA中，针对甲基化的和非甲基化的位点分别设计两个探针，每个探针都包括两个寡核苷酸部分，其中短的部分由合成产生，长的部分来源于phageM13的衍生物，后者有一个非杂交填充片段，不同探针其长度不同。探针的两个寡核苷酸杂交序列均与目标序列互补，其末端都连有相同的PCR引物。且要求[45]设计的MS-MLPA的探针要有甲基化敏感的限制性内切酶
，采用随酶提供的NEBuffer，在推荐的温度下温育4小时。通过可溶解的TCA着色，可以计算出反应体系中被标记的DAN的百分比，进而可以显示出核酸外切酶的污染。该种方法可检测出的底线是0.05%。 DNA片段的连接 DNA片段通过用每一种限制性内切酶 过量消化底物DNA而获得。这些片段随后用T4 DNA连接酶连接( 5′ 末端浓度为0.1-1.0 μM)。连接的片段然后用同一种限制性内切酶重切。仅当3′ 和 5′末端都保留完整，连接
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