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文献和实验1. 原理:LDH (乳酸脱氢酶) 是稳定的胞浆酶,存在所有的细胞中,当胞膜损伤时快速释放到细胞培养液中。 LDH 活性通过两个酶催化反应: LDH 氧化乳酸盐生成丙酮酸盐,然后丙酮酸盐和四唑盐 INT 反应生成甲( formazan )结晶。甲( formazan )结晶量在培养液中的增加,与裂解的细胞数增加直接相关。甲( formazan )结晶染料是水溶的,可以用分光光度计在 500nm 波长检测。通过检测细胞培养上清中
MTT的替代产品—XTT,WST-1,CCK-8(WST-8)
试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan(参考图1)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。 WST-1是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-1和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-1产生
kandr20051 最近在做细胞实验,用的是WST-1检测细胞活性。在检测的前72个小时,实验都符合预期,给药组的OD值比阴性对照组的要低,但是到了96个小时以后,WST-1的结果就逆转了。给药组的OD值远远高于阴性对照组。 但最奇怪的是,WST-1的检测结果与我镜下观察到的细胞形态和多少完全不同! 这是阴性对照组 这是给药组的 为什么会出现这种结果呢?
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