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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
试剂
- 保质期:
试剂
- 英文名:
-
- 库存:
有
- 供应商:
福州木辰
- CAS号:
620-92-8
- 规格:
B47006-1G
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文献和实验【摘要】目的 构建和表达抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。方法 采用PCR和overlap PCR方法构建抗CD3/抗CD20微型双功能抗体,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用Western blot和分子排阻层析鉴定纯化产物;采用免疫荧光法、放射免疫分析法和玫瑰花环试验鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。结果 DNA序列测定结果表明:抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体已构建成功,表达可溶性产物的产量达2mg/l以上,纯化产物中二
- Aldrich) 和 2.0 g SDS (Serva) 溶解于约 400 ml 去离子水中。 b. 用 4 mol/L HCl ( Merck) 调整 pH 至 8.6 并用去离子水定容至 500 ml。 c. 加入 50 mg 叠氮化钠(Merck) 并过滤。缓冲液可在 4°C 保存 2 周。 ( 5 ) 电极缓冲液储液:配制 5 L 电极缓冲液储液:溶解 58.0 g TriZma 碱(SigmaAldrich) ,299.6 g 甘氨酸( Sigma- Aldrich) 和 19
) 考马斯亮蓝 G-250 (Merck, Darmstadt,Germany), pH 7.0,4°C 贮藏备用。 ( 4 ) BN 阳极缓冲液(6 X ): 300 mmol/L BisTris,pH 7.0,4°C 贮藏备用。 2.3 第二相的 SDS-PAGE ( 1 ) 丙烯酰胺溶液:49.5% 丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺(32 : 1)。 ( 2 ) SDS 凝胶缓冲液:3 mol/L Tris-HCl,0.3% ( m/V)SDS,pH 8.45
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