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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
A549细胞ABHD16B基因过表达细胞株
- 库存:
10000
- 供应商:
上海淳麦
- 组织来源:
肺
- 物种来源:
人
- 器官来源:
肺
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
T25/冻存管
一、产品概述
A549细胞ABHD16B基因过表达细胞株 是 上海淳麦生物科技有限公司 构建的 ABHD16B 基因过表达稳转细胞株,宿主/载体细胞为 A549。该产品基于 "ABHD16B 功能研究" 需求定向构建,即购即用,可显著缩短研究者自行构建基因编辑细胞株的周期(常规自建需 2-4 个月)。
二、产品名称与长尾关键词
核心检索词:ABHD16B 基因过表达细胞株、ABHD16B overexpression cell line、A549 ABHD16B OE、ABHD16B 稳转细胞、CRISPR ABHD16B 基因过表达、ABHD16B 功能研究模型。
三、核心参数
| 产品名称 | A549细胞ABHD16B基因过表达细胞株 |
| 商品货号 | SHA-OE-0196 |
| 品牌 | 上海淳麦 |
| 细胞规格 | T25/冻存管 |
| 种属来源 | 人 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 组织来源 | 肺 |
| 器官来源 | 肺 |
| 宿主/载体细胞 | A549 |
| 产地 | 上海 |
| 供应商 | 上海淳麦生物科技有限公司 |
四、产品特点
- ABHD16B 靶向基因过表达,构建与鉴定围绕该基因位点展开
- 以 A549 为宿主背景(人肺腺癌),便于在熟悉细胞体系中开展机制研究
- 组织来源 肺,适配相应组织背景的功能与机制研究
- 冻存管规格发货,复苏后即可进入实验,便于批次管理与保种
- 即购即用,省去自行构建稳转株的筛选与验证周期
- 适用于药物敏感性评价与化合物筛选中的靶点高表达模型
- 可作为蛋白表达与病毒包装的 production 平台
五、适用范围
本 ABHD16B 基因过表达稳转细胞株主要用于 ABHD16B 基因功能获得(gain-of-function)研究,通过稳定上调 ABHD16B 表达解析其蛋白功能、互作网络与下游信号;适用于重组蛋白表达、病毒包装、细胞模型构建与药物敏感性评价等。宿主细胞 A549(人肺腺癌) 适用于相应组织来源相关研究。
六、构建与验证原理
ABHD16B 稳定过表达模型(货号 SHA-OE-0196)通过慢病毒介导的基因组整合实现:重组载体携带 ABHD16B 编码序列与筛选标记,感染 A549 细胞后经药筛富集阳性克隆并单克隆化。阳性株以 qPCR(mRNA 水平)与 Western blot(蛋白水平)验证 ABHD16B 上调幅度,确保后续功能实验的表达基础可靠。
七、细胞培养方案建议
1. 复苏:自液氮取出 ABHD16B 基因过表达株冻存管,37℃ 水浴轻柔晃动至完全融化,转入预温培养基后 100×g 离心 5 分钟洗去 DMSO,重悬接种(A549 常规 1–3×10⁵ cells/cm²),于 37℃、5% CO₂ 条件下静置培养,24 小时后首次换液以去除未贴壁细胞与碎片。
2. 培养条件:培养基以 10% FBS 完全培养基为主,可视需要加入双抗防止污染;A549 常规每 2–3 天换液,换液前后观察培养基颜色与 pH 变化,及时剔除异常孔/瓶。
3. 传代:贴壁细胞传代采用胰蛋白酶消化:弃培养液,PBS 轻洗 1–2 次,加入 0.25% Trypsin-EDTA,37℃ 孵育 1–3 分钟(镜下见细胞变圆、间隙增大即终止),加入含 10% FBS 的完全培养基终止消化并吹打脱壁,100×g 离心 5 分钟收集细胞,按 1:3–1:6 接种于新培养瓶。消化时间因细胞系而异,避免过度消化。
4. 倍增与接种:倍增时间因细胞系而异(常见肿瘤系 18–36 小时),建议 A549 维持在对数期、汇合度不超过 90%,以防止接触抑制与状态漂移。
5. 冻存:冻存前确保细胞处于对数期且无污染,按 1–3×10⁶ cells/mL 重悬于含 10% DMSO 的冻存液,分装后程序降温过夜再转入液氮;标注 ABHD16B 基因过表达株、代次与日期便于追溯。
6. 状态复核:连续传代 5–10 代后建议复核 ABHD16B 的基因过表达状态(敲除株以 PCR/测序、过表达株以 qPCR/WB),确认 A549 细胞中目标位点/表达水平未发生漂变。
八、保存与运输
交付形式为冻存管(货号 SHA-OE-0196)。冻存管收到后若暂不复苏,应立即转入液氮保存,切勿在 -20℃ 或 4℃ 长时间放置;产品通过干冰冷链运输,签收后请及时转入液氮或按培养方案复苏;ABHD16B 稳转株应尽量避免反复冻融,以维持 A549 细胞中目标基因的稳定表达与表型。
九、常见问题(FAQ)
- 长期传代后 ABHD16B 表达会衰减吗?
稳转株表达盒整合于基因组,一般较稳定;但长期传代仍可能出现表达漂移,建议控制代次并定期以 qPCR/WB 复核 ABHD16B 表达水平。 - 能否诱导表达或调控表达强度?
本株为组成型稳定过表达株。若需诱导或梯度调控 ABHD16B 表达,可考虑更换诱导型载体系统另行构建。 - 是否提供培养基与转染试剂配套?
本产品为细胞株,配套完全培养基、冻存液、支原体检测试剂与转染试剂可另行采购(见相关产品推荐)。 - 发货周期与运输方式?
按平台公示的交期发货,冻存管以干冰、培养瓶以冰袋运输;具体时效受库存与目的地影响,请以下单信息为准。 - 与自建细胞株相比优势?
即购即用,省去 2-4 个月自建与验证周期,批次一致性更可控。
十、相关产品推荐
· ABHD16B 基因敲除稳转株(loss-of-function 对照)
· 空载体对照稳转株
· 野生型 A549 细胞株(阴性对照)
· ABHD16B 相关抗体与 ELISA 试剂盒(检测表达/功能)
· qPCR / Western blot 验证试剂
十一、产品质控与售后
ABHD16B 基因过表达细胞株由 上海淳麦生物科技有限公司 供应,过表达株附 qPCR 与 Western blot 表达水平验证说明,本产品仅限科研用途,不用于临床诊断或治疗。运输采用干冰/冰袋保温,到货后请按规范复苏;如有质量问题请于签收后规定时间内与售后联系(货号 SHA-OE-0196,规格 T25/冻存管)。


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文献和实验大小检出(用抗报告基因或抗目的蛋白抗体); 功能验证:融合表达务必证明报告标签不影响蛋白原有功能(定位、互作、表型均正常)。 4. 冻存复检 每株至少冻存 6 支,复苏一支确认荧光维持和细胞状态后方可交付或使用。 --- 四、Luciferase 稳转株的特殊注意点 体内成像用的 Luciferase 稳转株有几个额外考量: 信号强度与细胞数线性相关:建株时应验证发光值与细胞数量的线性范围; 均一性要求高:用于动物实验的 luciferase 株建议用单克隆,避免混合克隆中低表达细胞稀释信号
1)Flp-In系统 产生背景 随着新技术的不断革新,针对真核质粒转染构建稳定表达细胞株的方法也不断地创新,出现了TALEN、IOS、Cas9和Flp-In等技术,不断地提高稳定表达细胞株构建的成功率。 Flp-In系统——以其独特的优势,广泛应用于构建过表达或静默特定基因的稳定表达细胞株,用于特定基因的功能研究。Flp-In系统依据酿酒酵母的DNA重组系统的特点,高效构建稳定哺乳动物表达细胞株。这种DNA重组系统应用重组酶(Flp)和定点重组技术,将目的基因插入到哺乳动物指定的基因组中
想长期表达某个基因,但它一高表达细胞就死、一过表达表型全是"中毒"——这时候很多老师会想到诱导表达系统: Tet 诱导稳定细胞株(Tet-On)怎么构建?和普通稳转株差在哪?诱导倍数怎么验证? 先说结论: Tet 诱导稳转株的核心是把"表达开关"装进稳转系统:细胞先稳定表达调控蛋白(Tet-On 的 rtTA),再引入由 TRE 应答元件控制的目的基因。平时不表达或低表达,加入诱导剂(多西环素 doxycycline)后才按剂量诱导表达。构建框架仍是"感染 → 筛选 → 验证 → 冻存
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