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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
SF488 TUNEL Apoptosis Kit(Green Fluorescence)
- 保质期:
保存在-20℃,避免反复冻融。
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 保存条件:
保存在-20℃,避免反复冻融。
- 规格:
50T/20T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥3540.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 20T | 产品价格: | ¥1768.00 |
Ex/Em:490/515
细胞发生凋亡时, 会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA,产生180 bp-200 bp的 DNA 片段,表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现的特异的梯状Ladder图谱。基因组DNA双链或单链断裂时会出现产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化作用下,与SF/Cy-dUTP结合,从而通过荧光显微镜或流式细胞仪直接进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。Tunel法可以对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征,可检测出极少量的凋亡细胞,因而在细胞凋亡的研究中广泛采用。本试剂盒应用范围广,可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。可选择性的检测凋亡细胞,而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的 DNA 链断裂的细胞。本试剂盒检测细胞凋亡,耗时短,只需一步染色反应,洗涤后即可检测。
注意事项
1.使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2.染色背景较重或非特异性着色明显时可适当减少染色时间。
3.实验时建议增加阴性对照和阳性对照组。
4.组分A使用时请佩戴口罩、手套,如接触皮肤,请立即用大量水冲洗。
5.荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验Enhanced Substrate Set*DAB 金属增强底物* 或 POD 底物替代物 光镜镜检封固剂 信号转换 section3.4 湿盒 Parafilm 石蜡封 口膜或盖片 产品概述: 特异性:TUNEL 反应优先标记凋亡产生的 DNA 链断裂,从而辨别凋亡与坏死、以及由抑 制细胞生长的药物或放射线产生的 primary DNA 链断裂 实验干扰:假阴性:在某些型式的凋亡细胞中 DNA 链断裂可能缺失或不完全。空间位阻, 如细胞外元件可能阻止 TdT 到达
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的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
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