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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
20
- 灵敏度:
37.5pg/ml
- 样本:
血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物:
血清/血浆
- 适应物种:
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用:
ELISA试剂盒
- 检测方法:
ELISA法
- 检测范围:
75pg/ml-4800pg/ml
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
检测原理:
通过特异性抗通用种属VE单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的VE结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后,形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB转化为蓝色,酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与VE含量成正比,酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数:
产品名称:维生素E(VE)ELISA试剂盒
英文名称: VE ELISA Kit
产品规格:48T/96T
检测样本:血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围:75pg/ml-4800pg/ml
灵敏度:37.5pg/ml
特异性:与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期:6个月(2-8℃保存)。
检测流程:
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体(捕获抗体),该抗体能专一识别并结合维生素E(VE)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)加入微孔中,样本中的VE会与包被抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的第二抗体(检测抗体),该抗体识别VE的另一个独立表位,从而形成“捕获抗体-VE-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物,在酸性终止液(如硫酸)作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与样本中VE浓度呈正相关。
数据及参考曲线:
| 校准品浓度(pg/mL) | 4800.00 | 2400.00 | 1200.00 | 600.00 | 300.00 | 150.00 | 75.00 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.725 | 1.569 | 0.873 | 0.490 | 0.301 | 0.161 | 0.095 | 0.048 |
| 校正OD值 | 2.678 | 1.522 | 0.826 | 0.443 | 0.253 | 0.113 | 0.047 | 0.000 |

操作步骤:
1.试剂平衡试剂盒室温平衡 30 min;浓缩洗涤液按说明书稀释混匀。
2.设孔加样设空白、标准品、待测样品孔,精准加样,封板。
3.温育结合37℃孵育 30–60 min,弃液拍干。
4.洗板加满洗涤液浸泡,甩干拍干,重复3–5 次。
5.加酶结合物除空白孔外每孔加 HRP 标记液,封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗净未结合游离酶,控干残留液体。
7.显色避光加显色液 A/B,避光 37℃显色 10–15 min。
8.终止读数加终止液变色稳定后,立刻酶标仪读 OD 值。
9.结果计算标准曲线拟合,换算样本浓度。
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