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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
Omnipotent nuclease
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 保存条件:
-20°C储存,干燥,避免反复冻融;超低温运输
- 规格:
O775185-100KU/O775185-2000KU/O775185-25KU/O775185-500KU
| 规格: | O775185-100KU | 产品价格: | ¥989.90 |
|---|---|---|---|
| 规格: | O775185-2000KU | 产品价格: | ¥13399.90 |
| 规格: | O775185-25KU | 产品价格: | ¥299.90 |
| 规格: | O775185-500KU | 产品价格: | ¥3899.90 |
基本描述
产品名称:重组全能核酸酶
规格或纯度:无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无菌, ≥99%(SDS-PAGE), ≥250 U/uL
产品介绍:
全能核酸酶(UltraNuclease),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于 Serratia Marcescen 的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下降解各种形式的 DNA 和 RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
【反应条件 Reaction conditions】
|
【产品特性】
1、本品经利用大肠杆菌 Escherichia coli (E. coli)大规模发酵表达纯化,纯度>95%,可用于科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究,并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
2、 本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH8.0,2mM MgCl2,20mM NaCl,50%甘油)中,无色透明液体。
【稳定性】
全能核酸酶在非常广泛的条件下,都能保持很高的稳定性和消化核酸的活性,这使其能够与多种细胞裂解液,如 RIPA,或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。例如:>100mM 的盐酸胍会完全抑制活性,1mM 的 EDTA 会部分抑制活性,5mM 的EDTA 会使活性丧失 90%,1mM 的 PMSF 则不会抑制核酸酶活性。
【使用方法】
1、细胞处理/Cell processing:
a. 贴壁细胞去除培养基,用 PBS 洗后,1mL RIPA 裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加1-2 μL全能核酸酶,室温或冰上孵育 5-30 min,收集裂解液,离心取上清即
可进行下游实验。
b. 悬浮细胞离心收集后,在离心管中加 1mL RIPA 裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加 1-2 μL 全能核酸酶,室温或冰上孵育 5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
2、组织样品/Organizational samples: 将 30-100 mg 动物或者植物组织研磨充分后,加入 100-200 μL 裂解液,同时加入加 0.5-1 μL 全能核酸酶,室温或冰上孵育 5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
3、大肠杆菌或者其他细菌/Escherichia coli or other bacteria: 细菌离心收集后,用裂解液裂解或者研磨破碎后,每 1 mL 加 0.5-1μL 全能核酸酶,室温孵育 30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
【用途和作用】
1、 去除疫苗类产品生产过程中的外源性核酸,提高产品的生物安全性;
2、 去除病毒颗粒表面缠绕的核酸,利于病毒颗粒的释放和纯化;
3、 降解细胞裂解液中的核酸,降低液体粘度,提高重组蛋白产量;
4、 处理用于 ELISA、电泳等分析,或柱层析纯化的样品,提高分辨率和回收率。
【注意事项 】
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
生物活性:效价: ≥250 U/μL。单位定义:在 37℃,pH 8.0 反应条件下,2.625 mL 反应体系中,在 30 min 内使△A260 吸收值变化 1.0 所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
Accession #:
级别:无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无菌
产品规格参数
储存缓冲液:20 mM Tris-HCl, 2mM MgCl2, 20mM NaCl, 50% Glycerol, pH8.0
浓度:≥250 U/uL
储存条件:-20°C储存,干燥,避免反复冻融
运输条件:超低温运输
稳定性与储存:-20℃储存(2年);收货后建议分装,避免反复冻融, 密封。
CAS编号和信息:9025-65-4
酶学委员会编号:3.1.30.2
功能和特点
Accession #:
生物活性:效价: ≥250 U/μL。单位定义:在 37℃,pH 8.0 反应条件下,2.625 mL 反应体系中,在 30 min 内使△A260 吸收值变化 1.0 所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
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文献和实验人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
LBO的形态学。 下图显示了具有折叠结构(箭头)的最佳类器官,可以选择这些类器官在使用 3dGRO™ 肺类器官成熟培养基(步骤 4)的 ECM基质胶包埋夹层培养中进一步成熟。 第 4 步:将肺芽类器官 (LBO) 分化为成熟的肺类器官(第 25-60 天) 1. 在冰上解冻降低生长因子浓度的ECM 基质胶 (E6909)。 2. 使用无菌镊子将无菌 24 孔细胞培养小室放到未经组织培养处理的 24 孔板中,每孔使用一个培养小室。 3. 将 50 µL 冷的含100% 减生长因子ECM基质胶分装
恒定37℃、5% CO₂、饱和湿度,杜绝温度、气体波动,避免细胞生长停滞或自发分化。 培养基选择:优先使用mTeSR™1、Essential 8™、StemFlex™等成分明确的无血清培养基,提前分装-20℃保存,严禁反复冻融破坏成分。 细胞外基质包被:选用LN521(重编程阶段)、Matrigel(扩增阶段可用),均匀覆盖培养皿底面,推荐4℃过夜包被或37℃静置1小时以上,包被后可4℃保存1周。 ROCK抑制剂使用:复苏、传代当天必须添加10 μM Y-27632,抑制单细胞凋亡,且需24小时
Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
1. 引言 随着 20 世纪七八十年代重组 DNA 技术的出现,已发展出大量的合成和筛选寡核苷酸文库的新方法,用于研究和了解是哪些序列编码了具有期望特性的新蛋白质,这些特性包括在特定条件下酶的活性、结合力以及蛋白质的稳定性 [ 1〜8 ] 。对于任何一个给定的例子,要进行此类蛋白质的工程研究,必须具备两个条件:构建多样化序列文库的策略和从文库中筛选具有特定性质产物的有效方法。其中,选择何种方法合成文库至关重要,因为这决定了文库能否提供大量充足的筛选空间,从而最大限度的为得到编码蛋白质特定
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