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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
Omnipotent nuclease
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 保存条件:
-20°C储存,干燥,避免反复冻融;超低温运输
- 规格:
O775185-100KU/O775185-2000KU/O775185-25KU/O775185-500KU
| 规格: | O775185-100KU | 产品价格: | ¥989.90 |
|---|---|---|---|
| 规格: | O775185-2000KU | 产品价格: | ¥13399.90 |
| 规格: | O775185-25KU | 产品价格: | ¥299.90 |
| 规格: | O775185-500KU | 产品价格: | ¥3899.90 |
基本描述
产品名称:重组全能核酸酶
规格或纯度:无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无菌, ≥99%(SDS-PAGE), ≥250 U/uL
产品介绍:
全能核酸酶(UltraNuclease),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于 Serratia Marcescen 的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下降解各种形式的 DNA 和 RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
【反应条件 Reaction conditions】
|
【产品特性】
1、本品经利用大肠杆菌 Escherichia coli (E. coli)大规模发酵表达纯化,纯度>95%,可用于科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究,并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
2、 本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH8.0,2mM MgCl2,20mM NaCl,50%甘油)中,无色透明液体。
【稳定性】
全能核酸酶在非常广泛的条件下,都能保持很高的稳定性和消化核酸的活性,这使其能够与多种细胞裂解液,如 RIPA,或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。例如:>100mM 的盐酸胍会完全抑制活性,1mM 的 EDTA 会部分抑制活性,5mM 的EDTA 会使活性丧失 90%,1mM 的 PMSF 则不会抑制核酸酶活性。
【使用方法】
1、细胞处理/Cell processing:
a. 贴壁细胞去除培养基,用 PBS 洗后,1mL RIPA 裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加1-2 μL全能核酸酶,室温或冰上孵育 5-30 min,收集裂解液,离心取上清即
可进行下游实验。
b. 悬浮细胞离心收集后,在离心管中加 1mL RIPA 裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加 1-2 μL 全能核酸酶,室温或冰上孵育 5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
2、组织样品/Organizational samples: 将 30-100 mg 动物或者植物组织研磨充分后,加入 100-200 μL 裂解液,同时加入加 0.5-1 μL 全能核酸酶,室温或冰上孵育 5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
3、大肠杆菌或者其他细菌/Escherichia coli or other bacteria: 细菌离心收集后,用裂解液裂解或者研磨破碎后,每 1 mL 加 0.5-1μL 全能核酸酶,室温孵育 30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
【用途和作用】
1、 去除疫苗类产品生产过程中的外源性核酸,提高产品的生物安全性;
2、 去除病毒颗粒表面缠绕的核酸,利于病毒颗粒的释放和纯化;
3、 降解细胞裂解液中的核酸,降低液体粘度,提高重组蛋白产量;
4、 处理用于 ELISA、电泳等分析,或柱层析纯化的样品,提高分辨率和回收率。
【注意事项 】
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
生物活性:效价: ≥250 U/μL。单位定义:在 37℃,pH 8.0 反应条件下,2.625 mL 反应体系中,在 30 min 内使△A260 吸收值变化 1.0 所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
Accession #:
级别:无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无菌
产品规格参数
储存缓冲液:20 mM Tris-HCl, 2mM MgCl2, 20mM NaCl, 50% Glycerol, pH8.0
浓度:≥250 U/uL
储存条件:-20°C储存,干燥,避免反复冻融
运输条件:超低温运输
稳定性与储存:-20℃储存(2年);收货后建议分装,避免反复冻融, 密封。
CAS编号和信息:9025-65-4
酶学委员会编号:3.1.30.2
功能和特点
Accession #:
生物活性:效价: ≥250 U/μL。单位定义:在 37℃,pH 8.0 反应条件下,2.625 mL 反应体系中,在 30 min 内使△A260 吸收值变化 1.0 所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
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文献和实验人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
LBO的形态学。 下图显示了具有折叠结构(箭头)的最佳类器官,可以选择这些类器官在使用 3dGRO™ 肺类器官成熟培养基(步骤 4)的 ECM基质胶包埋夹层培养中进一步成熟。 第 4 步:将肺芽类器官 (LBO) 分化为成熟的肺类器官(第 25-60 天) 1. 在冰上解冻降低生长因子浓度的ECM 基质胶 (E6909)。 2. 使用无菌镊子将无菌 24 孔细胞培养小室放到未经组织培养处理的 24 孔板中,每孔使用一个培养小室。 3. 将 50 µL 冷的含100% 减生长因子ECM基质胶分装
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其他实验。 指标 gentleMACS™ 传统方法 处理时间 3 分钟/ 2个样本 >30 分钟/ 样本 细胞活性 ≥90% 50%-70% 得率 提升 30%-50% 低且不稳定 操作复杂度 全自动标准化 手工操作,易出错 生物安全 封闭系统,防泄漏 开放式操作,风险高 半自动化方案(gentleMACS)所需套装: 名称 gentleMACS™ Dissociator gentleMACS 25 C Tubes Tissue
恒定37℃、5% CO₂、饱和湿度,杜绝温度、气体波动,避免细胞生长停滞或自发分化。 培养基选择:优先使用mTeSR™1、Essential 8™、StemFlex™等成分明确的无血清培养基,提前分装-20℃保存,严禁反复冻融破坏成分。 细胞外基质包被:选用LN521(重编程阶段)、Matrigel(扩增阶段可用),均匀覆盖培养皿底面,推荐4℃过夜包被或37℃静置1小时以上,包被后可4℃保存1周。 ROCK抑制剂使用:复苏、传代当天必须添加10 μM Y-27632,抑制单细胞凋亡,且需24小时
技术资料暂无技术资料 索取技术资料






