豚鼠转化生长因子β1（TGF-β1）ELISA检测试剂盒

豚鼠转化生长因子β1（TGF-β1）ELISA检测试剂盒

技术参数
检测方法：双抗体夹心法
适用种属：豚鼠
规格：48T / 96T
保存条件：2～8℃避光保存；有效期 6 个月

适用样本类型
豚鼠血清、乏血小板血浆（EDTA 抗凝，不建议肝素抗凝）
细胞培养上清液
组织匀浆液、细胞裂解液
其他无菌生物体液
样本注意：避免严重溶血、脂血；分装 - 20℃/-80℃冻存，禁止反复冻融。

试剂盒组分
30倍浓缩洗涤液              终止液
酶标试剂                         标准品
酶标包被板                       标准品稀释液
样品稀释液         说明书
显色剂A液        封板膜
显色剂B液        密封袋

检测原理
微孔板预先包被抗豚鼠 TGF-β1 特异性捕获抗体；
加入标准品 / 待测样本，样本中 TGF-β1 与固相捕获抗体结合；
洗涤后加入生物素化检测抗体，形成固相抗体–TGF-β1 抗原–生物素化抗体夹心复合物；
洗涤后加入 HRP 标记链霉亲和素；充分洗涤去除未结合物质；
加入 TMB 底物，HRP 催化底物生成蓝色产物；加入终止液变为黄色；
酶标仪 450nm 读取 OD 值，OD 与样本中 TGF-β1 浓度正相关，通过标准曲线计算样本浓度。

操作流程
试剂平衡至室温，浓缩洗涤液纯水稀释；复溶标准品，倍比稀释建立梯度标准曲线
加标准品 / 样本，37℃孵育 90 min
洗板，加入生物素化抗体工作液，37℃孵育 60 min
洗板，加入 HRP 酶结合物工作液，37℃孵育 30 min
洗板，加入 TMB 显色液，37℃避光显色 10–20 min
加入终止液，450 nm 快速测定 OD 值
标准曲线拟合，计算样本 TGF-β1 浓度

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。