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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Chlamydia Pneumoniae Detection Kit (Real-Time PCR Method)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T/盒
衣原体通用型(CP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
基本信息
产品名称:衣原体通用型(CP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
英文名称:Chlamydia Pneumoniae Detection Kit (Real-Time PCR Method)
规格:50T / 盒
适用样本:动物血液、脾脏、肺脏及气管分泌物、肠粘膜及内容物,流产胎儿及流产分泌物等样本。
适用仪器:ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
储存与有效期:-20±5℃保存,有效期 12 个月;避免反复冻融(≤5–7 次)
试剂盒主要组成
包装规格 50T/盒
CP 反应液 500μL×2 管
酶液 50μL×1 管
CP 阳性质控品 50μL ×1 管
阴性质控品 250μL ×1 管
CP 阳性标准品(2.35×108 copies/mL) 50μL ×1 管
CP 阳性标准品(2.35×107 copies/mL) 50μL ×1 管
CP 阳性标准品(2.35×106 copies/mL) 50μL ×1 管
CP 阳性标准品(2.35×105 copies/mL) 50μL ×1 管
关键性能指标
灵敏度:最低检测限 1000拷贝 / ML
线性范围:10²–10⁸拷贝 / 反应,5 个数量级
重复性:CV≤2%,复孔 Ct 差异≤0.5
抗干扰:血红蛋白、胆红素、黏液等常见抑制剂不影响
操作流程(25μL 体系)
样本处理:
提取:用磁珠 / 柱提法纯化 DNA
免提:取 5μL 样本 + 5μL 释放剂,95℃ 5min
反应体系配制:
2× 预混液:12.5μL
引物探针:2.5μL
模板 / 对照:5μL
补水至 25μL
扩增程序:
UNG 处理:37℃ 2min
预变性:95℃ 3min
循环(40 次):95℃ 5s → 55℃ 40s(FAM 采集荧光)
结果判读:
结果分析条件设定
设置 Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。
注意事项
分区操作:样本处理、配液、扩增三区分离
试剂避光,融化后充分混匀离心
结果仅供参考,结合临床综合判断
本产品仅供科研,不作临床使用
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文献和实验衣原体通用型(CP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
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