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充足
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5×1 mL
4×非还原蛋白上样缓冲液
产品货号(型号):EG23235
产品规格:5×1 mL
核心优势:
• 专为SDS-PAGE非还原电泳设计,不含β-巯基乙醇或DTT,避免二硫键断裂;
• 含SDS、甘油、溴酚蓝及Tris-HCl缓冲体系,确保蛋白充分变性(热变性)与电泳迁移一致性;
• 预混即用型,4×浓度,使用前按1:3比例以去离子水稀释即可;
• 无菌过滤,低内毒素,兼容Western Blot、考马斯亮蓝染色等下游应用;
• 愚公生物品质控制严格,每批次提供COA报告。
同系列产品:
• EG23234 —— 4×还原蛋白上样缓冲液(含DTT)
• EG23236 —— 2×非还原蛋白上样缓冲液
• EG23237 —— 5×非还原蛋白上样缓冲液(含0.1% SDS增强型)
• EG23238 —— 4×非还原蛋白上样缓冲液(无溴酚蓝,适配荧光检测)
FAQ:
1. Q:本缓冲液是否需要添加β-巯基乙醇或DTT?
A:不需要。本品为非还原型,严禁添加还原剂,否则将导致二硫键断裂,影响天然构象分析。
2. Q:能否直接用于样品煮沸变性?
A:可以。按1份缓冲液 + 3份样品混合后,95–100℃加热5–10分钟即可完成变性。
3. Q:是否含酚红?是否影响后续质谱分析?
A:不含酚红;主要成分为SDS、甘油、Tris-HCl、溴酚蓝,常规Western Blot无干扰;如用于质谱,建议透析或合规有机溶剂沉淀去除SDS。
4. Q:储存条件与稳定性如何?
A:4℃避光保存,有效期12个月;反复冻融不宜超过3次,建议分装使用。
5. Q:与Thermo Fisher或Bio-Rad同类产品是否兼容?
A:配方对标主流非还原缓冲液标准(pH ~6.8),电泳迁移行为一致,可无缝替代。
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文献和实验多大浓度、多少量的上样缓冲液视样品的浓度而定。 selleckchem01 就是蛋白样品加上loading buffer后加热来处理蛋白。比例是…6×buffer:蛋白样品=5:1(体积比) keathy0505 当然是要加上loading buffer再煮啊! 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
过硫酸胺 0.1 g ,加超纯水1.0 mL 溶解后,4 ℃ 保存,保存时间为 1 周。(-20 ℃长期保存) 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中,定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS(2L) NaOH 调 pH 值至 7.4,定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后,分装于 1.5 mL 离心管中,4 ℃ 可保存数周,-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存,1 次溶液可重复
-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次(对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤)。 加入预冷的 RIPA 液(含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂),RIPA 液的用量:按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注:悬浮细胞,收集
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